Agilent NovoCyte Penteon
Флагманский проточный цитометр-анализатор линейки NovoCyte. 5 лазеров (355, 405, 488, 561, 640 нм), до 30+ параметров. УФ-лазер 355 нм открывает доступ к BUV-красителям. Перистальтический насос, NovoSampler Q для автоматизации. ПО NovoExpress.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Настольный проточный цитометр-анализатор |
| Масса | ~40 кг |
| Лазеры | 5: 355, 405, 488, 561, 640 нм |
| Форм-фактор | Настольный |
| Формат данных | FCS 3.0 / 3.1 |
| Автозагрузчик | NovoSampler Q (96/384-луночные планшеты, стрипы, пробирки) |
| Объёмный подсчёт | Да, перистальтический насос (без калибровочных бус) |
| Скорость анализа | До 35 000 событий/сек |
| Параметры детекции | До 30+ (28+ FL + FSC + SSC) |
| Флуоресцентные каналы | До 28+ |
| Программное обеспечение | NovoExpress |
Описание
Назначение
Agilent NovoCyte Penteon - старший проточный цитометр-анализатор линейки NovoCyte, линейки NovoCyte. 5 лазеров, до 30+ параметров. Пять лазеров, включая УФ 355 нм, дают доступ к полимерным красителям BUV, BV, BB, VioBright для панелей из 25-30 маркеров.
Место в линейке
Penteon - старшая аналитическая модель в линейке NovoCyte. Базовый NovoCyte предлагает до 3 лазеров и 13 параметров, Quanteon - 4 лазера и 25 параметров, Advanteon - улучшенную чувствительность в 4-лазерной конфигурации.
Все модели объединены общей архитектурой: перистальтический насос, ПО NovoExpress, совместимость с NovoSampler. Penteon завершает линейку как инструмент для панелей экспертного класса.
Принцип работы
Классическая фильтровая оптическая схема с расширенной оптической скамьёй: 5 лазеров возбуждают флуоресценцию, сигнал регистрируется через узкополосные фильтры детекторами. Матричная компенсация корректирует перетоки между каналами.
До 30+ параметров (28+ FL + FSC + SSC) позволяют строить панели из 20-25 маркеров с резервными каналами для контроля жизнеспособности и маркеров исключения (lineage dump).
Позиция на рынке
Penteon является прямым конкурентом BD LSRFortessa X-20, Beckman Coulter CytoFLEX LX и Cytek Aurora в сегменте многопараметрических анализаторов. Это классический фильтровый анализатор, а не спектральный.
Для панелей 15-25 маркеров Penteon проще в работе спектральных систем: компенсация проще спектрального размешивания, не требуется снятие референсных спектров. Для панелей свыше 30 маркеров спектральные системы безальтернативны.
Ключевые технологии
Пятилазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| УФ | 355 нм | BUV395, BUV496, BUV563, BUV615, BUV661, BUV737, BUV805 |
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV650, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Жёлто-зелёный | 561 нм | PE, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7, PE-Dazzle 594 |
| Красный | 640 нм | APC, APC-Cy7, APC-R700, Alexa Fluor 700 |
УФ-лазер 355 нм открывает доступ к семейству BUV - одним из наиболее ярких полимерных флуорохромов, широко используемых в панелях высокой размерности. Без 355 нм лазера эти 7+ красителей недоступны, что существенно ограничивает максимальный размер панели.
Расширенная детекция (до 30+ параметров)
Penteon использует расширенную оптическую скамью с увеличенным числом детекторов по каждой лазерной линии. Фильтры оптимизированы для минимизации спектрального перекрытия при работе с 20+ красителями.
Подобная размерность ранее была доступна только на системах класса BD LSRFortessa/FACSymphony.
Перистальтический насос
Фирменная технология линейки NovoCyte. Абсолютный объёмный подсчёт клеток без калибровочных бус. В контексте Penteon ценно для высокопараметрических клинических панелей, где абсолютные числа клеток (CD4+ T-клетки/мкл, NK-клетки/мкл) дополняют процентные соотношения.
Сниженный расход sheath-жидкости. Для core-facility, работающих с десятками образцов ежедневно, это существенная экономия.
NovoSampler Q
Автозагрузчик нового поколения: 96- и 384-луночные планшеты, стрипы, одиночные пробирки. Совместимость с 384-луночными планшетами особенно актуальна для высокопараметрических экспериментов с большим количеством одноцветных и FMO-контролей.
Программируемые протоколы: перемешивание, регулируемый объём, обратная промывка.
Низкий расход sheath-жидкости
Как и все модели NovoCyte, Penteon потребляет значительно меньше sheath-жидкости за счёт перистальтического насоса. Это снижает затраты на расходные материалы и уменьшает объём жидких биологических отходов.
Для кого подходит
- Системная иммунология - панели на 20-25 маркеров для профилирования иммунной системы: наивные/памяти/эффекторные T-клетки, Treg, Tfh, gd T, NK, NKT, B-клетки, плазмабласты, моноциты, DC
- Иммуноонкология - TIL-панели, мониторинг ответа на чекпоинт-ингибиторы, экспрессия PD-1/PD-L1/CTLA-4/Tim-3/LAG-3
- Клеточная терапия - расширенный контроль качества CAR-T с панелями дифференцировки, истощения и функциональности
- Вакцинология - многоцветный анализ антиген-специфического ответа с измерением нескольких цитокинов и маркеров дегрануляции
- Трансплантология - мониторинг иммунной реконституции после аллоТКМ с максимальной детализацией
- Гематология - расширенные диагностические панели для лейкозов и лимфом (15-20 маркеров одновременно)
- Core-facility - универсальный инструмент от 4-цветных панелей до 25-цветных экспериментов
- Высокопроизводительный скрининг - автоматическая обработка 384-луночных планшетов
Особенности эксплуатации
ПО
NovoExpress (расширенная версия) - помимо стандартных инструментов включает модули для работы с высокоразмерными данными: автоматическое построение компенсационных матриц 25x25+, интерактивная визуализация матрицы, экспорт для tSNE/UMAP в сторонних пакетах.
Совместимость с FlowJo, FCS Express, Cytobank. Формат данных: FCS 3.0/3.1.
Установка
- Форм-фактор: настольный, ~40 кг
- Стол усиленной конструкции (от 100 кг с аксессуарами)
- Температура: 18-25°C
- Подвод сжатого воздуха не требуется
- Электропитание: стандартная сеть 220 В
Обслуживание
Ежедневная калибровка с QC-бусами (10-15 минут). NovoExpress автоматически отслеживает параметры производительности и предупреждает при отклонениях.
Годовое плановое ТО: проверка и юстировка всех 5 лазеров, замена фильтров, калибровка fluidics. Расходные материалы: sheath-жидкость, промывочный раствор, QC-бусы.
Обучение
Панели 20+ маркеров требуют серьёзной квалификации. Ключевые навыки:
- Дизайн панели по правилу "яркий краситель - на слабый антиген" с инструментами FluoroFinder или Agilent Panel Design Tool
- Подготовка компенсационных бус (UltraComp, VersaComp) для матрицы 25x25
- FMO-контроли для панелей свыше 12 маркеров (обязательны для корректного гейтирования)
Базовое обучение: 3-5 дней. Полное освоение высокопараметрических панелей: несколько месяцев практики.
Ограничения
- Классический фильтровый анализатор (не спектральный): максимум ~30 параметров
- Стоимость реагентов при панелях 20-25 антител с премиальными красителями (BUV, BV) значительна
- Компенсационная матрица 25x25+ чувствительна к ошибкам в одноцветных контролях
- FMO-контроли для полной панели требуют до 30-55 пробирок на эксперимент
- Только анализ, функция сортировки отсутствует
Области применения
Сравнение с аналогами
LSRFortessa X-20 выпускается с 2012 года: до 5 лазеров, до 20 параметров. Penteon имеет больше по числу параметров (30+ vs 20) и включает объёмный подсчёт. LSRFortessa обладает огромной установленной базой, клинической валидацией и модульной оптикой с заменой фильтров. Для новых установок Penteon предлагает больше параметров за меньшую цену.
CytoFLEX LX - 6 лазеров (355, 405, 488, 561, 638, 808 нм), до 21 параметра. На один лазер больше (808 нм для ИК-красителей), но меньше каналов (21 vs 30+). CytoFLEX LX предлагает модульную оптику и компактный форм-фактор. Penteon имеет по суммарному числу параметров и объёмному подсчёту.
Aurora - полноспектральный анализатор с 64+ детекторами, 40+ маркеров. Принципиально иная технология: спектральное размешивание вместо фильтровой детекции. Aurora шире по размерности (40+ vs 30). Penteon проще в использовании (классическая компенсация). Для панелей 15-25 маркеров обе системы дают сопоставимый результат.
Частые вопросы
Чем Penteon отличается от Quanteon и когда стоит доплатить?
Принципиальное отличие - УФ-лазер 355 нм, открывающий доступ к BUV-красителям. BUV-семейство (BUV395, BUV496, BUV563, BUV615, BUV661, BUV737, BUV805) - это 7+ дополнительных ярких флуорохромов, увеличивающих максимальный размер панели с ~20 до ~28 маркеров. Доплата оправдана при регулярной работе с панелями >15 маркеров и планах использовать BUV-красители.
Может ли Penteon конкурировать со спектральными анализаторами (Cytek Aurora, Sony ID7000)?
Penteon - классический фильтровый анализатор. При 30 параметрах он приближается к нижней границе возможностей спектральных систем (Aurora - 40+, ID7000 - 44+). Фильтровые системы проще: компенсация проще размешивания, не нужны референсные спектры. Для панелей 15-25 маркеров Penteon проще в работе. Для 30+ маркеров спектральные системы безальтернативны.
Сколько одноцветных контролей нужно для 25-цветной панели?
Минимум 25 одноцветных контролей + неокрашенный контроль = 26 пробирок для компенсации. Для корректного гейтирования добавляются FMO-контроли - в полной реализации ещё 25 пробирок (полная панель минус один краситель). На практике FMO делают для критических каналов. Общее количество контролей: 30-55 пробирок.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.