Thermo Fisher Attune NxT
Проточный цитометр-анализатор с технологией акустической фокусировки. До 4 лазеров (405, 488, 561, 638 нм), до 16 флуоресцентных параметров. Скорость подачи образца до 35 мкл/сек - на порядок быстрее гидродинамических систем. Автозагрузчик для 96/384-луночных планшетов.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Проточный цитометр-анализатор с акустической фокусировкой |
| Лазеры | До 4: 405, 488, 561, 638 нм |
| Детекторы | ФЭУ (PMT) с полосовыми фильтрами |
| Формат данных | FCS 3.1 |
| Автозагрузчик | 96- и 384-луночные планшеты |
| Каналы детекции | До 16 флуоресцентных + FSC/SSC |
| Режимы скорости | 4 режима (от стандартного до максимального) |
| Объёмный подсчёт | Встроенный (без калибровочных бус) |
| Скорость анализа | До 35 000 событий/сек |
| Технология фокусировки | Акустическая (ультразвуковая) + гидродинамическая |
| Программное обеспечение | Attune NxT Software |
| Максимальная скорость подачи | До 35 мкл/сек (до 12,5 мл/мин) |
Описание
Назначение
Thermo Fisher Attune NxT - проточный цитометр-анализатор, в котором традиционная гидродинамическая фокусировка дополнена акустической. Пьезоэлектрический элемент генерирует ультразвуковую стоячую волну, выстраивающую клетки в центральной оси потока независимо от скорости подачи образца. Это позволяет анализировать образцы со скоростью до 35 мкл/сек при сохранении качества фокусировки.
Место в линейке
Attune NxT - чисто аналитический прибор без функции сортировки. Для визуализации клеток в потоке предназначена расширенная модель Attune CytPix, построенная на той же платформе.
В линейке Thermo Fisher Attune NxT занимает позицию высокопроизводительного анализатора. CytPix добавляет встроенную камеру для brightfield/флуоресцентной визуализации клеток.
Принцип работы
В классическом цитометре клетки выстраиваются гидродинамически: поток образца сужается потоком шитовой жидкости до ширины одной клетки. Увеличение скорости подачи нарушает ламинарную фокусировку и ухудшает качество данных.
В Attune NxT перед зоной лазерного облучения расположен пьезоэлектрический элемент, генерирующий ультразвуковую стоячую волну. Акустическое давление выталкивает клетки в центр потока, позволяя увеличить объёмную скорость подачи в 10 и более раз без потери качества фокусировки.
Позиция на рынке
Attune NxT занимает уникальную нишу: прибор оптимизирован под скорость пропускания образца, а не под максимальное число параметров. С 16 каналами он уступает спектральным анализаторам по размерности панелей, но превосходит все классические системы по объёмной скорости.
Основные конкуренты - BD FACSCanto II, Beckman Coulter CytoFLEX, Agilent NovoCyte - используют гидродинамическую фокусировку и работают при скорости 1-3 мкл/сек.
Ключевые технологии
Акустическая фокусировка
Центральная технология Attune NxT. Ультразвуковая стоячая волна выталкивает клетки в центральную ось потока независимо от скорости подачи образца. CV (коэффициенты вариации) остаются стабильными на всех режимах скорости.
Акустическая фокусировка также препятствует образованию агрегатов и осаждению клеток на стенках проточной ячейки. Это снижает риск засорения при работе с "грязными" образцами: цельной кровью, тканевыми суспензиями.
Объёмная скорость до 35 мкл/сек
Четыре режима скорости подачи: от стандартного (сопоставимого с классическими цитометрами) до максимального. Для анализа 1 мл образца на максимальной скорости потребуется около 30 секунд вместо 5-15 минут.
| Режим | Применение |
|---|---|
| Стандартный | Рутинное иммунофенотипирование |
| Средний | Стандартные панели, умеренные объёмы |
| Высокий | Разбавленные образцы, редкие события |
| Максимальный (35 мкл/сек) | CTC, большие объёмы, скрининг |
Лазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Жёлто-зелёный | 561 нм | PE, PE-Cy5, PE-Cy7 |
| Красный | 638 нм | APC, APC-Cy7, Alexa 700 |
Четыре лазерные линии покрывают основные семейства флуорохромов. Отсутствие УФ-лазера (355 нм) исключает использование BUV-красителей.
Объёмный подсчёт клеток
Встроенный перистальтический насос с точным контролем объёма позволяет определять абсолютные концентрации клеток без добавления калибровочных бус (CountBright). Это упрощает рабочий процесс и снижает стоимость анализа.
Автозагрузчик для планшетов
Встроенная опция для автоматизированного анализа 96- и 384-луночных планшетов. Скорость обработки планшета значительно выше, чем у классических цитометров, благодаря акустической фокусировке.
Для кого подходит
- Детекция редких клеточных популяций - CTC, MRD, циркулирующие эндотелиальные клетки; высокая скорость позволяет проанализировать большой объём и набрать статистически значимое количество событий
- Высокопроизводительный скрининг - анализ библиотек клеточных линий, скрининг антител, оценка цитотоксичности на 96/384-луночных планшетах
- Микробиология и экология - анализ бактериальных и фитопланктонных сообществ; большие объёмы разбавленных проб обрабатываются за минуты
- Фармацевтика и биотехнология - контроль качества клеточных линий, мониторинг биопроцессов, объёмный подсчёт клеток
- Клиническая иммунология - рутинное иммунофенотипирование с высокой пропускной способностью
- Ветеринарная медицина - анализ крови животных; "грязные" образцы с агрегатами не засоряют проточную ячейку
- Исследования стволовых клеток - подсчёт CD34+ клеток в трансплантатах большого объёма
- Экологический мониторинг - анализ водных проб с низкой концентрацией целевых частиц
Особенности эксплуатации
ПО
Attune NxT Software - единая платформа для настройки эксперимента, автоматической компенсации, сбора данных и базового анализа. Четыре режима скорости подачи переключаются программно.
Данные сохраняются в формате FCS 3.1. Полная совместимость с FlowJo, FCS Express, Kaluza и другими программами анализа.
Установка
- Форм-фактор: настольный, средние размеры
- Температура: 18-25°C
- Влажность: до 80%
- Электропитание: стандартная сеть
- Специальных помещений не требуется
Обслуживание
Ежедневная калибровка с помощью Attune Performance Tracking Beads занимает около 10 минут. Процедура полуавтоматическая. Промывка между образцами автоматизирована.
Расходные материалы: Attune Focusing Fluid (специализированная шитовая жидкость для акустической фокусировки), промывочный раствор, раствор для деконтаминации, калибровочные бусы. Использование неоригинальной шитовой жидкости (PBS, физраствор) не допускается - акустическая фокусировка зависит от акустических свойств среды.
Обучение
Базовое обучение от Thermo Fisher занимает 2-3 дня. Освоение прибора не сложнее, чем классического цитометра. Ключевое отличие - понимание выбора оптимального режима скорости для конкретной задачи.
При работе с высокой концентрацией клеток на максимальной скорости возможны совпадения (coincidence events). ПО отображает частоту событий в реальном времени для контроля качества.
Ограничения
- Только анализ, функция сортировки отсутствует (для визуализации - Attune CytPix)
- 16 каналов - недостаточно для панелей 20+ маркеров, уступает спектральным системам
- Нет УФ-лазера 355 нм - BUV-красители недоступны
- Специализированная шитовая жидкость Attune Focusing Fluid - дороже стандартного физраствора
- При высокой концентрации клеток на максимальной скорости возможны coincidence events
Области применения
Сравнение с аналогами
FACSCanto II - один из самых распространённых клинических анализаторов: до 3 лазеров (405, 488, 633 нм), до 10 параметров, гидродинамическая фокусировка. Attune NxT превосходит по числу лазеров (4 vs 3), каналов (16 vs 10) и скорости пропускания образца (в 10+ раз). FACSCanto II - проверенная клиническая платформа с IVD-сертификацией и огромной установленной базой.
CytoFLEX - компактный анализатор с WDM-оптикой, до 6 лазеров (LX) и до 21 канала. Превосходит Attune NxT по числу параметров (21 vs 16) и лазеров (6 vs 4). Однако CytoFLEX использует гидродинамическую фокусировку и не конкурирует по скорости пропускания образца. CytoFLEX - выбор для максимума параметров в компактном формате, Attune NxT - для максимальной скорости.
NovoCyte - настольный анализатор с до 3 лазерами и до 13 параметрами. Отличается простотой эксплуатации и конкурентной ценой. Attune NxT превосходит по скорости пропускания (акустическая фокусировка) и числу параметров (16 vs 13). NovoCyte - бюджетный вариант для стандартных задач.
Частые вопросы
Как акустическая фокусировка влияет на качество данных?
Акустическая фокусировка не ухудшает, а в ряде случаев улучшает качество данных по сравнению с чисто гидродинамической. Ультразвуковая стоячая волна выстраивает клетки точно в центральной оси потока, что обеспечивает стабильные CV на всех скоростях подачи образца. В классических цитометрах увеличение скорости подачи ухудшает фокусировку и расширяет CV.
Для каких задач Attune NxT предпочтительнее спектральных анализаторов?
Attune NxT - лучший выбор, когда критична скорость пропускания образца, а не количество параметров. Типичные задачи: поиск редких событий (CTC - 1 клетка на миллион), анализ больших объёмов разбавленных проб, высокопроизводительный скрининг планшетов. Если главная задача - максимальное число маркеров (30+), лучше выбрать спектральный анализатор. Attune NxT с 16 каналами оптимален для панелей до 14 маркеров.
Можно ли использовать обычную шитовую жидкость (PBS) вместо Attune Focusing Fluid?
Нет. Акустическая фокусировка зависит от акустических свойств среды - плотности, скорости звука и вязкости. Attune Focusing Fluid специально разработан для оптимальной передачи ультразвуковой энергии. Использование PBS или физраствора может привести к нестабильной фокусировке, ухудшению CV и неправильным результатам объёмного подсчёта.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.