Cytek Aurora CS
Полноспектральный клеточный сортер с 64+ детекторами и до 5 лазерами (355, 405, 488, 561, 638 нм). Панели на 40+ маркеров с одновременной 4-way сортировкой. Jet-in-air технология. Развитие аналитической платформы Cytek Aurora. ПО SpectroFlo CS.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Полноспектральный клеточный сортер (jet-in-air) |
| Лазеры | До 5: 355, 405, 488, 561, 638 нм |
| Детекторы | 64+ APD (лавинные фотодиоды) |
| Технология | Full Spectrum Profiling + Spectral Unmixing |
| Форм-фактор | Напольный/настольный |
| Формат данных | FCS 3.1 |
| Биобезопасность | Jet-in-air, аэрозольный контейнмент опционально |
| Режимы сортировки | 2-way, 4-way, в пробирки и планшеты (96/384) |
| Автофлуоресценция | Автоматическое вычитание |
| Параметры детекции | 40+ одновременных маркеров |
| Программное обеспечение | SpectroFlo CS |
Описание
Назначение
Cytek Aurora CS (Cell Sorter) - полноспектральный клеточный сортер, построенный на платформе анализатора Cytek Aurora. Система дополняет аналитические возможности платформы функцией физического разделения клеточных популяций.
Место в линейке
Aurora CS - единственный сортер в линейке Cytek. Анализатор Aurora обеспечивает высокопроизводительный скрининг и фенотипирование, младшая модель Northern Lights предлагает до 3 лазеров для панелей средней сложности.
Типичная схема работы: анализ когорты на Aurora, выбор целевых популяций, сортировка конкретных образцов на Aurora CS. Протоколы и панели полностью совместимы между платформами.
Принцип работы
Как и Aurora, сортер регистрирует полный эмиссионный спектр каждой частицы на 64+ детекторах. Алгоритм spectral unmixing разделяет вклады отдельных флуорохромов с высокой точностью.
Механика сортировки классическая (jet-in-air): формирование капель, зарядка, электростатическое отклонение. Поддерживается одновременное разделение на 4 популяции в пробирки или планшеты.
Позиция на рынке
Aurora CS - первый серийный полноспектральный сортер, объединивший глубокое фенотипирование (40+ маркеров) с физическим выделением клеток. Ранее для анализа такой размерности требовалась масс-цитометрия (CyTOF), не позволяющая сортировку живых клеток.
Широкая установленная база анализаторов Aurora обеспечивает совместимость протоколов между анализом и сортировкой в пределах одной лаборатории.
Ключевые технологии
Полноспектральная детекция (Full Spectrum Profiling)
Каждый из 64+ детекторов регистрирует сигнал в узком спектральном окне, формируя "спектральный отпечаток" флуорохрома. Это принципиально иной подход по сравнению с традиционной схемой "один фильтр - один канал".
Полноспектральная детекция использует всю информацию об эмиссии, что повышает чувствительность и точность разделения перекрывающихся красителей.
Спектральное размешивание (Spectral Unmixing)
Математический метод разделения вкладов отдельных флуорохромов в суммарный спектр. В отличие от классической компенсации, учитывает полную форму спектра, а не только перетоки в соседние каналы.
Это позволяет разделять флуорохромы с очень близкими пиками эмиссии (например, FITC и BB515), что невозможно в традиционных системах. Автофлуоресценция обрабатывается как отдельный "краситель" и вычитается.
Лазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| УФ | 355 нм | BUV395, BUV496, BUV661, BUV737 |
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Жёлто-зелёный | 561 нм | PE, PE-Cy5, PE-Cy7 |
| Красный | 638 нм | APC, APC-Cy7, Alexa 700 |
5 лазерных линий обеспечивают оптимальное покрытие всего доступного спектра флуорохромов. Панели на 40+ маркеров - возможность, недоступная ни одному другому серийному сортеру.
4-way сортировка
Одновременное разделение образца на 4 популяции с помощью электростатического отклонения капель. Режимы: сортировка в пробирки (1,5; 5; 15 мл), в 96- и 384-луночные планшеты.
Для задач одноклеточного анализа поддерживается индексная сортировка с полной спектральной характеристикой каждой клетки.
Jet-in-air механика
Несмотря на революционную детекцию, механика сортировки классическая. Это обеспечивает высокую скорость и совместимость с существующими протоколами сортировки.
Jet-in-air система генерирует аэрозоли, поэтому для работы с потенциально инфекционным материалом требуется аэрозольный контейнмент или бокс биологической безопасности.
Для кого подходит
- Системная иммунология - глубокое фенотипирование с сортировкой 40+ параметров, выделение десятков субпопуляций из одного образца
- Онкоиммунология - сортировка T-клеток, макрофагов, дендритных клеток, MDSC из опухолевого микроокружения
- Геномика одиночных клеток - индексная сортировка с полной спектральной характеристикой для корреляции с транскриптомными данными
- Клеточная терапия - контроль качества CAR-T с расширенными панелями дифференцировки и истощения
- Вакцинология - выделение антиген-специфичных клеток из сложных популяций, многоцветный анализ цитокинового профиля
- Трансплантология - мониторинг иммунной реконституции после трансплантации костного мозга
- Фундаментальная иммунология - изучение гетерогенности популяций, недоступной в стандартных 8-12-цветных панелях
Особенности эксплуатации
ПО
SpectroFlo CS - расширенная версия SpectroFlo, знакомая пользователям анализаторов Aurora. Включает инструменты для дизайна панелей, спектрального размешивания, контроля качества и определения гейтов сортировки.
Данные сохраняются в формате FCS 3.1. Полная совместимость с FlowJo, FCS Express и другими программами анализа.
Установка
- Форм-фактор: напольный/настольный (jet-in-air сортер)
- Температура: 18-25°C
- Аэрозольный контейнмент: опционально
- Требуется выделенное пространство для сортировочного модуля
- Электропитание: стандартная сеть
Обслуживание
Ежедневная калибровка с помощью калибровочных бус Cytek нормализует чувствительность всех 64+ детекторов. Рекомендуется перед первым экспериментом каждого дня.
Настройка drop delay и частоты капель выполняется стандартным образом, как на классических jet-in-air сортерах. Расходные материалы: шитовая жидкость, промывочный раствор, калибровочные бусы.
Обучение
Работа со спектральным сортером предъявляет повышенные требования к квалификации. Необходимо понимание принципов спектрального размешивания, правил подбора флуорохромов и интерпретации результатов. Обучение занимает 3-5 дней.
Для панелей свыше 20 цветов требуется тщательная оптимизация: подбор пар "антитело - флуорохром" с учётом уровня экспрессии и яркости красителя. Сообщество Aurora активно делится панелями через Full Spectrum Viewer.
Ограничения
- Стоимость системы и реагентов (большие панели антител) существенно выше, чем у классических сортеров
- Дизайн панелей 30-40 маркеров требует экспертного уровня
- Jet-in-air генерирует аэрозоли, ограничивая работу с инфекционным материалом без контейнмента
- 4-way сортировка (у Bigfoot - 6-way)
- Вычислительная нагрузка при обработке данных с 64+ детекторов требует производительного компьютера
Области применения
Сравнение с аналогами
FACSAria Fusion - классический jet-in-air сортер с до 5 лазерами, до 20 параметрами и 4-way сортировкой. Проверенная платформа с огромной методической базой. Ограничен классической фильтровой детекцией: максимум 18-20 параметров, матричная компенсация. Aurora CS принципиально превосходит по количеству одновременных маркеров (40+ vs 18-20) и точности разделения перекрывающихся красителей.
Bigfoot - другой полноспектральный сортер на рынке, поддерживающий панели высокой размерности. Оснащён до 7 лазерами и предлагает 6-way сортировку (больше, чем 4-way у Aurora CS). Однако платформа Aurora имеет значительно более широкую установленную базу, что обеспечивает лучшую совместимость протоколов между анализом и сортировкой.
MA900 - чиповый сортер с традиционной (не спектральной) детекцией: до 4 лазеров, 12 каналов. Значительно проще в эксплуатации: одноразовые чипы, нет калибровки drop delay, минимум аэрозолей. Ограничен 12 параметрами. Aurora CS - выбор для максимальной размерности панелей, MA900 - для простоты и биобезопасности.
Частые вопросы
В чём преимущество спектральной сортировки перед традиционной?
Традиционные сортеры детектируют флуоресценцию через набор полосовых фильтров - каждый канал видит узкий участок спектра. Спектральный сортер регистрирует полный эмиссионный спектр на 64+ детекторах и математически разделяет вклады красителей. Это позволяет использовать флуорохромы с близкими спектрами и строить панели на 40+ маркеров вместо 15-20. Автофлуоресценция вычитается как отдельный компонент.
Нужен ли опыт работы с обычными сортерами перед переходом на Aurora CS?
Желателен, но не обязателен. Механика сортировки (капельная, jet-in-air) идентична классическим системам, поэтому понимание drop delay, частоты капель и режимов сортировки полезно. Однако анализ данных принципиально отличается: спектральное размешивание вместо компенсации. Обучение занимает 3-5 дней.
Можно ли использовать Aurora CS для простых 4-цветных экспериментов?
Да, спектральная детекция автоматически обрабатывает любое количество маркеров. Однако приобретение Aurora CS для работы только с 4-цветными панелями экономически нецелесообразно. Aurora CS оправдан, если лаборатория планирует работу с панелями от 15 маркеров и выше.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.