Cytek Northern Lights
Полноспектральный проточный анализатор начального уровня от Cytek Biosciences. 1-3 лазера (405, 488, 638 нм), до 24+ параметров за счёт технологии спектрального размешивания. Доступная точка входа в спектральную проточную цитометрию. ПО SpectroFlo.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Полноспектральный проточный цитометр-анализатор |
| Лазеры | 1-3: 405, 488, 638 нм |
| Детекторы | Массивы APD (лавинные фотодиоды) |
| Технология | Full Spectrum Profiling + Spectral Unmixing |
| Форм-фактор | Настольный, компактный |
| Формат данных | FCS 3.1 |
| Скорость анализа | До 35 000 событий/сек |
| Загрузка образцов | Пробирки |
| Автофлуоресценция | Автоматическое вычитание |
| Параметры детекции | До 24+ одновременных маркеров |
| Программное обеспечение | SpectroFlo |
Описание
Назначение
Cytek Northern Lights - полноспектральный проточный цитометр-анализатор, разработанный как доступная точка входа в спектральную проточную цитометрию. Прибор построен на той же технологической платформе, что и старшая модель Cytek Aurora, но с уменьшенным числом лазеров: от 1 до 3.
Место в линейке
Northern Lights - младшая модель в линейке спектральных цитометров Cytek. Старшая модель Aurora поддерживает до 5 лазеров и 40+ маркеров, сортер Aurora CS добавляет функцию физического разделения клеток.
Northern Lights не является "урезанной" версией Aurora. Архитектура детекции идентична: все детекторы собирают полный спектр эмиссии, а SpectroFlo выполняет спектральное размешивание. Ограничение только в числе лазерных линий возбуждения.
Принцип работы
Каждая частица, проходящая через лазерный луч, генерирует флуоресцентный сигнал. Массив APD-детекторов регистрирует полный спектр эмиссии, формируя "спектральный отпечаток" каждого флуорохрома.
Суммарный спектр раскладывается на вклады отдельных красителей математически (spectral unmixing). С 3 лазерами Northern Lights различает до 24+ флуорохромов, тогда как классический 3-лазерный анализатор ограничен 10-13 параметрами.
Позиция на рынке
Northern Lights позиционируется для лабораторий, работающих с панелями средней сложности (8-24 маркера). Для подразделений, ранее работавших с 10-12-параметрическими анализаторами, прибор предлагает существенное расширение возможностей при умеренной стоимости.
Трёх лазеров (405, 488, 638 нм) достаточно для большинства иммунологических панелей до 16-20 цветов. Отсутствие УФ (355 нм) и жёлто-зелёного (561 нм) лазеров ограничивает доступ к BUV-красителям и некоторым PE-тандемам.
Ключевые технологии
Полноспектральная детекция (Full Spectrum Profiling)
Вместо одного фотоумножителя с узким полосовым фильтром на каждый краситель Northern Lights использует массив детекторов, покрывающий весь спектральный диапазон эмиссии. Результат - многомерный спектральный профиль каждой частицы.
Количество извлекаемой информации принципиально выше, чем при фильтровой детекции. Это даёт возможность3-лазерной системе достигать функциональности, сопоставимой с 4-5-лазерными классическими анализаторами.
Спектральное размешивание (Spectral Unmixing)
Математическая процедура, заменяющая классическую матричную компенсацию. Суммарный спектр каждой частицы раскладывается на линейную комбинацию эталонных спектров отдельных флуорохромов.
Unmixing использует полную форму спектра, а не только перетоки в соседние каналы. Красители с практически идентичными пиками эмиссии, неразличимые на классическом цитометре, успешно разделяются спектрально.
Лазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Красный | 638 нм | APC, APC-Cy7, Alexa Fluor 700 |
Три наиболее универсальные длины волн покрывают основные семейства: BV (Brilliant Violet), FITC/PE/PerCP, APC и их тандемы. Конфигурации с 1 или 2 лазерами также доступны.
APD-детекторы
Как и в Aurora, Northern Lights использует лавинные фотодиоды (APD) вместо классических ФЭУ. APD дают высокую квантовую эффективность в красной и ИК-областях, стабильность и компактность.
Это особенно важно для детекции красных и дальне-красных флуорохромов (APC, APC-Cy7, Alexa Fluor 700).
Вычитание автофлуоресценции
Клетки обладают собственной флуоресценцией, особенно выраженной у макрофагов, эозинофилов и дендритных клеток. В классической цитометрии автофлуоресценция создаёт фон, затрудняющий детекцию тусклых маркеров.
Spectral unmixing обрабатывает автофлуоресценцию как отдельный "флуорохром" с собственным спектральным отпечатком. Фон действенно вычитается, чувствительность возрастает.
Для кого подходит
- Иммунология и аллергология - расширенное иммунофенотипирование, панели на 16-24 маркера с тремя лазерами
- Онкоиммунология - характеризация опухолевого микроокружения, чекпоинтные рецепторы (PD-1, CTLA-4, TIM-3, LAG-3) в одной пробирке
- Гематология - многоцветная диагностика гемобластозов с улучшенным разрешением перекрывающихся красителей
- Клеточная терапия - фенотипирование и контроль качества CAR-T, панели дифференцировки и истощения T-клеток
- Вакцинология - одновременная оценка активации, пролиферации и цитокинового профиля
- Микробиология и вирусология - детекция внутриклеточных патогенов, анализ иммунного ответа на инфекции
- Образование и core-лаборатории - доступная спектральная платформа для обучения студентов и постдоков
- Лаборатории, планирующие масштабирование - навыки SpectroFlo и библиотеки спектральных референсов полностью переносятся на Aurora
Особенности эксплуатации
ПО
SpectroFlo - единая платформа для всех спектральных цитометров Cytek (Northern Lights, Aurora, Aurora CS). Оператор, обученный на Northern Lights, может без переподготовки работать на Aurora, и наоборот.
Включает инструменты для дизайна спектральных панелей, расчёта спектрального размешивания, визуализации и экспорта данных в формате FCS 3.1. Полная совместимость с FlowJo, FCS Express и другими программами анализа.
Установка
- Форм-фактор: настольный, компактный
- Температура: 18-25°C
- Влажность: до 80%
- Электропитание: стандартная сеть
- Специальных помещений не требуется
Обслуживание
Ежедневная калибровка с помощью стандартных калибровочных бус Cytek занимает около 10 минут. Процедура автоматизирована в SpectroFlo.
Расходные материалы: шитовая жидкость (Sheath Fluid), промывочный раствор, калибровочные бусы. Расход шитовой жидкости умеренный.
Обучение
Переход на спектральную цитометрию требует изменения мышления: вместо компенсации - спектральное размешивание, вместо канала - спектральный профиль. Обучение занимает 2-3 дня для пользователей с опытом классической цитометрии.
Онлайн-инструмент Full Spectrum Viewer от Cytek помогает подбирать подходящые комбинации флуорохромов. Сообщество пользователей активно делится валидированными панелями.
Ограничения
- Только анализ, функция сортировки отсутствует
- Отсутствие УФ-лазера (355 нм) исключает использование BUV-красителей
- Отсутствие жёлто-зелёного лазера (561 нм) ограничивает подходящее возбуждение PE-тандемов
- Максимум ~24 параметра (для 40+ маркеров нужна Aurora)
- Дизайн спектральных панелей требует учёта спектральной "похожести" красителей
Области применения
Сравнение с аналогами
FACSymphony A1 - компактный классический анализатор BD с до 3 лазерами (405, 488, 638 нм) и до 12 параметрами. Использует традиционные ФЭУ с полосовыми фильтрами. Northern Lights с теми же 3 лазерами даёт до 24+ параметров за счёт спектральной детекции - двукратное преимущество. FACSymphony A1 проще в освоении (классическая компенсация) и глубоко интегрирован с экосистемой BD.
CytoFLEX S - компактный анализатор с WDM-оптикой, до 3 лазеров и до 13 каналов. Использует APD-детекторы, как и Northern Lights, но с классической (не спектральной) детекцией. Northern Lights имеет больше по числу параметров (24+ vs 13) при том же наборе лазеров. CytoFLEX S проще в работе и лучше подходит для стандартных панелей, не требующих более 13 маркеров.
Attune NxT - анализатор с акустической фокусировкой, до 4 лазеров, до 16 параметров. Ключевое преимущество - высокая скорость пропускания образца (до 35 мкл/сек). Northern Lights уступает по скорости, но имеет больше по числу параметров (24+ vs 16) и способности вычитать автофлуоресценцию. Attune NxT предпочтительнее для задач с большим объёмом образца.
Частые вопросы
Чем Northern Lights отличается от Cytek Aurora?
Northern Lights и Aurora построены на одной спектральной технологии и управляются одним ПО SpectroFlo. Ключевое различие - количество лазеров: Northern Lights поддерживает до 3 (405, 488, 638 нм), Aurora - до 5 (плюс 355 и 561 нм). Это определяет максимальное число параметров: ~24 у Northern Lights против 40+ у Aurora. Отсутствие УФ-лазера (355 нм) у Northern Lights исключает использование BUV-красителей, а отсутствие жёлто-зелёного (561 нм) ограничивает подходящее возбуждение PE-тандемов.
Действительно ли 3 лазера могут заменить 4-5 лазеров классического цитометра?
В значительной мере - да. Спектральная детекция извлекает больше информации из каждого флуорохрома, чем один полосовой фильтр. Northern Lights с 3 лазерами различает 20+ красителей, тогда как классический 3-лазерный анализатор ограничен 10-13 каналами. Однако некоторые флуорохромы (например, BUV-серия) требуют УФ-лазера 355 нм, которого у Northern Lights нет.
Стоит ли покупать Northern Lights, если в перспективе понадобится Aurora?
Northern Lights - разумный первый шаг. Все навыки работы со SpectroFlo, библиотеки спектральных референсов и оптимизированные панели полностью переносятся на Aurora. При последующем приобретении Aurora Northern Lights не становится ненужным - он может обслуживать рутинные задачи, высвобождая Aurora для сложных экспериментов.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.