Leica STELLARIS 5
Конфокальный лазерный сканирующий микроскоп с White Light Laser (440-790 нм), позволяющим выбрать произвольную длину волны возбуждения. Детекторы Power HyD, технология LIGHTNING для повышения разрешения. ПО LAS X.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Конфокальный лазерный сканирующий с WLL |
| Детекторы | До 5x Power HyD (гибридные, счёт фотонов) |
| Форм-фактор | Сканирующая головка на штативе |
| Модальности | Конфокал, LIGHTNING (SR), FRAP, FRET, FLIM (TauSense), Z-стек, тайлинг, спектральный имиджинг |
| Лазерные линии | WLL 440-790 нм (до 8 линий) + 405 нм (диод) |
| Метод сканирования | Гальванометрический; резонансный (опция) |
| Совместимые штативы | DMi8 (инверт.), DM6 (прямой) |
| Скорость сканирования | До 40 кадров/сек (резонансный, 512x512) |
| Разрешение (аксиальное) | 400 нм (стандартный конфокал); улучшение с LIGHTNING |
| Программное обеспечение | LAS X |
| Разрешение (латеральное) | 140 нм (LIGHTNING, NA 1.4, 488 нм); 180 нм (стандартный конфокал) |
| Объективы (макс увеличение) | HC PL APO, до 100x/1.47 oil TIRF |
Описание
Назначение
Leica STELLARIS 5 - конфокальная система среднего класса с перестраиваемым White Light Laser (WLL), обеспечивающим свободный выбор длины волны возбуждения в диапазоне 440-790 нм. Прибор предназначен для мультиплексных экспериментов и лабораторий, работающих с широким спектром флуорофоров.
Место в линейке
STELLARIS 5 - базовая модель конфокальной платформы STELLARIS. Выше располагается Leica STELLARIS 8, добавляющий улучшенные детекторы Power HyD S и опциональный STED-модуль для наноскопии (до 50 нм). Платформа STELLARIS заменила предыдущее поколение SP8.
STELLARIS 5 включает WLL и детекторы Power HyD в базовой конфигурации. STED недоступен.
Принцип работы
WLL генерирует суперконтинуум белого света. Акустооптический перестраиваемый фильтр (AOTF) выделяет нужные длины волн с точностью до 1 нм. До 8 линий возбуждения одновременно из одного источника.
Детекторы Power HyD работают в режиме счёта фотонов (photon counting), обеспечивая линейный отклик и минимальный шум. Конфокальная фильтрация через регулируемый pinhole.
Позиция на рынке
STELLARIS 5 конкурирует с Zeiss LSM 980 (Airyscan) и Nikon AX (поле 25 мм). Главное конкурентное преимущество - WLL, позволяющий оптимально возбуждать любой флуорофор без компромиссов. Zeiss предлагает аппаратное сверхразрешение (Airyscan), Nikon - увеличенное поле зрения.
Ключевые технологии
White Light Laser (WLL)
Перестраиваемый лазерный источник покрывает диапазон 440-790 нм с шагом настройки 1 нм. Заменяет набор из 6-8 дискретных лазеров одним источником. До 8 линий возбуждения одновременно.
WLL позволяет точно подобрать длину волны возбуждения под максимум абсорбции каждого флуорофора. Особенно ценно для нестандартных красителей, флуоресцентных белков нового поколения и FRET-экспериментов.
Детекторы Power HyD
Гибридные детекторы, сочетающие вакуумную фотокатодную трубку с лавинным фотодиодом. Работают в режиме счёта фотонов (photon counting). Квантовая эффективность до 45%. Минимальный тёмновой шум.
LIGHTNING
Программный модуль адаптивной деконволюции. Повышает эффективное разрешение до 120 нм на основе вычислительной обработки данных с Power HyD. Работает в реальном времени во время сбора данных.
В отличие от Airyscan (Zeiss), LIGHTNING - чисто вычислительный метод, не требующий специального детектора. Результат зависит от соотношения сигнал/шум входных данных.
TauSense
Набор инструментов для работы с временем жизни флуоресценции (fluorescence lifetime). Позволяет разделять флуорофоры не только по спектру, но и по кинетике затухания. Полезен для FRET, FLIM и разделения автофлуоресценции.
Для кого подходит
- Клеточная биология - мультиплексная визуализация 6+ маркеров с оптимальным возбуждением
- Нейробиология - live-cell imaging нейронов с минимальной фототоксичностью
- Биофизика - FRET, FLIM, анизотропия флуоресценции
- Иммунология - мультипараметрический анализ иммунных клеток в тканях
- Ботаника - разделение автофлуоресценции хлорофилла от целевых меток
- Core-лаборатории - универсальная платформа для работы с любыми флуорофорами
Особенности эксплуатации
ПО
LAS X - интегрированная платформа для управления, сбора и анализа. Модули LIGHTNING, TauSense, 3D-визуализация. Экспорт в LIF, TIFF, OME-TIFF.
Установка
Виброизолированный стол обязателен. Затемнённое помещение от 10 м². Стабильная температура. Совместим со штативами DMi8 (инверт.) и DM6 (прямой). WLL не требует водяного охлаждения.
Обслуживание
WLL имеет срок службы более 10 000 часов. Калибровка спектра автоматическая. Сервисный контракт с Leica рекомендуется (ежегодная юстировка).
Обучение
Базовый курс 3-5 дней. Настройка WLL интуитивна (выбор длины волны из списка флуорофоров). LIGHTNING и TauSense требуют дополнительного обучения.
Ограничения
- WLL не покрывает УФ-диапазон (ниже 440 нм); для DAPI нужен дополнительный лазер 405 нм
- STED-модуль недоступен (только в STELLARIS 8)
- LIGHTNING - вычислительный метод, уступает аппаратному Airyscan по надёжности SR-реконструкции
- Стоимость WLL и Power HyD выше набора дискретных лазеров и стандартных PMT
Области применения
Сравнение с аналогами
STELLARIS 8 добавляет Power HyD S, опциональный STED (50 нм) и расширенный TauSense. STELLARIS 5 достаточен для стандартных конфокальных и мультиплексных задач. STELLARIS 8 необходим для наноскопии (STED) и предельной чувствительности.
LSM 980 оснащён Airyscan 2 (аппаратное SR, 120 нм) и спектральным Quasar. STELLARIS 5 предлагает WLL (свободный выбор возбуждения) и TauSense (lifetime). LSM 980 сильнее в SR, STELLARIS 5 - в гибкости возбуждения и lifetime-анализе.
AX предлагает рекордное поле зрения 25 мм с дискретными лазерами. STELLARIS 5 - WLL для оптимального возбуждения любого флуорофора при стандартном поле 18 мм. AX для крупноформатной визуализации, STELLARIS 5 для мультиплексных спектральных задач.
Частые вопросы
Чем STELLARIS 5 отличается от STELLARIS 8?
STELLARIS 8 добавляет улучшенные детекторы Power HyD S с расширенным диапазоном чувствительности и опциональный STED-модуль (разрешение до 50 нм). STELLARIS 5 включает WLL и Power HyD в базе, но STED недоступен. Для задач сверхразрешения ниже 120 нм необходим STELLARIS 8.
Зачем White Light Laser, если хватает 4 дискретных лазеров?
WLL позволяет точно подобрать длину волны под максимум абсорбции каждого флуорофора. Дискретные лазеры вынуждают идти на компромисс. Особенно критично для FRET (точная настройка донора), флуоресцентных белков нового поколения (mScarlet, mNeonGreen) и мультиплексных экспериментов с 6+ красителями.
LIGHTNING или Airyscan?
LIGHTNING - вычислительный метод (деконволюция), Airyscan - аппаратный (32-элементный детектор). Airyscan более надёжен и не зависит от SNR исходных данных. LIGHTNING доступен на каждой системе STELLARIS без дополнительного оборудования. Оба достигают примерно 120 нм.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.