Miltenyi Biotec MACSQuant VYB
Трехлазерный настольный проточный цитометр-анализатор с нетипичной комбинацией лазеров: фиолетовый (405 нм), желто-зеленый (561 нм) и синий (488 нм). До 10 флуоресцентных каналов. Оптимизирован для флуоресцентных белков GFP/RFP, красителей жизнеспособности и PE-конъюгатов.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Настольный проточный цитометр-анализатор |
| Лазеры | 3: 405 нм (фиолетовый), 488 нм (синий), 561 нм (желто-зеленый) |
| Форм-фактор | Настольный, не требует внешних коммуникаций |
| Формат данных | FCS 3.0/3.1 |
| Скорость анализа | До 25 000 событий/сек |
| Загрузка образцов | Одиночные пробирки или автозагрузчик |
| Флуоресцентные каналы | До 10 |
| Абсолютный счет клеток | Да, волюметрический (без бисов) |
| Общее число параметров | До 12 (10 FL + FSC + SSC) |
| Программное обеспечение | MACSQuantify |
| Автоматическая компенсация | Да, встроенная в MACSQuantify |
Описание
Назначение
MACSQuant VYB - настольный проточный цитометр-анализатор с нестандартной комбинацией трех лазеров: фиолетового (405 нм), желто-зеленого (561 нм) и синего (488 нм). Отсутствие красного лазера (633-640 нм) - осознанное конструктивное решение в пользу точного возбуждения флуоресцентных белков и PE-конъюгатов.
Место в линейке
Аббревиатура VYB (Violet - Yellow/green - Blue) отражает спектральный состав лазерной системы. Прибор не является прямым конкурентом стандартных трехлазерных анализаторов (405/488/638 нм), а представляет альтернативную конфигурацию для лабораторий, работающих с репортерными белками.
Базовый MACSQuant Analyzer 10 (488/638 нм) предлагает APC-канал, но лишен BV и желто-зеленого лазера. Старший MACSQuant X (405/488/638 нм) добавляет планшетный загрузчик для HTS. Картриджный сортер MACSQuant Tyto дополняет линейку функцией сортировки.
Принцип работы
Три лазера последовательно возбуждают флуорохромы на каждой клетке, проходящей через проточную ячейку. Желто-зеленый лазер 561 нм попадает практически в пик поглощения PE (около 565 нм), с приростом яркости в 1,5-2 раза по сравнению с возбуждением при 488 нм.
Для красного флуоресцентного белка (RFP/mCherry/tdTomato) лазер 561 нм дает на порядок более эффективное возбуждение, чем 488 нм. Прецизионный шприцевой насос даёт волюметрический абсолютный счет клеток без калибровочных бисов.
Позиция на рынке
VYB занимает узкую нишу: прибор оптимален для лабораторий молекулярной биологии, активно работающих с GFP/RFP-репортерными конструкциями. Прямых аналогов с такой комбинацией лазеров на рынке мало.
Конкуренты с желто-зеленым лазером (Agilent NovoCyte Quanteon, Beckman Coulter CytoFLEX) обычно включают и красный лазер, что делает их более универсальными, но и более дорогими.
Ключевые технологии
Желто-зеленый лазер 561 нм
Центральный элемент, определяющий специализацию прибора. Длина волны 561 нм расположена значительно ближе к пику поглощения PE (около 565 нм), чем стандартный 488 нм. Результат — существенно более яркий сигнал PE и его тандемных конъюгатов (PE-Cy5, PE-Cy7).
Для RFP/mCherry/tdTomato преимущество еще более выражено. Лазер относится к типу DPSS (Diode-Pumped Solid State); современные DPSS-лазеры имеют ресурс, достаточный для многолетней эксплуатации.
| Лазер | Длина волны | Основные флуорохромы |
|---|---|---|
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, DAPI, Pacific Blue |
| Синий | 488 нм | FITC, GFP, PerCP |
| Желто-зеленый | 561 нм | PE, PE-Cy5, PE-Cy7, mCherry, tdTomato |
Фиолетовый лазер 405 нм
Возбуждает Brilliant Violet (BV) флуорохромы, DAPI, Hoechst, Pacific Blue, AmCyan и красители серии LIVE/DEAD Fixable Blue/Violet. Наличие фиолетового лазера значительно расширяет палитру панелей по сравнению с двухлазерным Analyzer 10.
В сочетании с синим и желто-зеленым лазерами формируется мощная тройка для одновременной детекции GFP (488 нм), RFP (561 нм) и маркера жизнеспособности (405 нм) в мультирепортерных системах.
Волюметрический абсолютный счет клеток
Прецизионный шприцевой насос подает известный объем образца через проточную ячейку. Абсолютная концентрация клеток вычисляется без калибровочных бисов.
Функция важна для количественной оценки эффективности трансфекции и мониторинга пролиферации.
Автоматическая компенсация и шаблоны
MACSQuantify выполняет автоматический расчет компенсационной матрицы по одноцветным контролям. Miltenyi предоставляет преднастроенные шаблоны для популярных панелей, включая панели для трансфекции (GFP + RFP + живые/мертвые).
Интеграция с экосистемой MACS
Полная совместимость с реагентами, антителами и расходными материалами Miltenyi Biotec. Программные протоколы MACSQuantify оптимизированы для совместного использования с системами магнитной сепарации MACS.
Для кого подходит
- Лаборатории молекулярной биологии - анализ эффективности трансфекции GFP/RFP-конструкциями, мультирепортерные клеточные линии
- Исследователи, работающие с PE-панелями - лазер 561 нм точно попадает в пик поглощения PE и PE-тандемов для высокочувствительных панелей
- Иммунология и клеточная биология - многоцветное иммунофенотипирование с BV-, FITC-, PE- и PerCP-конъюгатами
- Исследования апоптоза и жизнеспособности - широкий выбор красителей, возбуждаемых фиолетовым лазером (DAPI, LIVE/DEAD Violet)
- Клеточная сепарация с MACS - контроль чистоты и выхода после магнитного разделения с расширенными панелями
- Лаборатории стволовых клеток - анализ GFP-маркированных клеточных линий, мониторинг дифференцировки
Особенности эксплуатации
ПО
MACSQuantify - единая программная платформа для всех приборов линейки MACSQuant. Включает специфические шаблоны для желто-зеленого лазера и панелей трансфекции.
Данные экспортируются в формате FCS 3.0/3.1. Полная совместимость с FlowJo, FCS Express и другими программами анализа.
Установка
- Форм-фактор: настольный, габариты и масса сопоставимы с Analyzer 10
- Температура: 18-25 C
- Не требует подключения к газу или водопроводу
- Расходные жидкости (MACSQuant Running Buffer) поставляются в готовых канистрах
Обслуживание
Автоматические циклы промывки при включении и выключении минимизируют риск засорения. Регулярное обслуживание аналогично Analyzer 10: замена расходных жидкостей и периодическая калибровка.
Расходные материалы: MACSQuant Running Buffer, промывочный раствор, калибровочные бусы.
Обучение
Базовое обучение занимает 1-2 дня. Переход с Analyzer 10 на VYB не требует значительной переподготовки, интерфейс MACSQuantify единый.
Ключевой навык при работе с VYB - грамотный дизайн панелей без APC-флуорохромов. Замена APC-конъюгатов на PE-тандемы и BV-альтернативы требует понимания спектральных ограничений.
Ограничения
- Отсутствие красного лазера (633-640 нм) делает невозможным использование APC, APC-Cy7, APC-H7, Alexa Fluor 647/700
- Стандартные панели на основе FITC/PE/APC/APC-Cy7 требуют адаптации
- Желто-зеленый лазер 561 нм генерирует более высокий уровень автофлуоресценции клеток по сравнению с красным 638 нм
- Для задач, требующих и PE-оптимизации, и APC-канала, необходим четырехлазерный анализатор (например, Agilent NovoCyte Quanteon)
Области применения
Сравнение с аналогами
Analyzer 10 - двухлазерная модель (488 + 638 нм) с 8 FL-каналами. Имеет красный лазер для APC-флуорохромов, но лишен фиолетового (нет BV) и желто-зеленого (менее эффективное возбуждение PE). Analyzer 10 лучше для стандартных панелей с APC-конъюгатами, VYB - для задач с флуоресцентными белками и PE-оптимизированных панелей. VYB также предлагает большее число каналов (10 против 8).
CytoFLEX S - компактный анализатор с 2-4 лазерами и до 13 FL-каналов. В конфигурации V4-B2-Y2-R2 покрывает все стандартные флуорохромы, включая APC. CytoFLEX S использует лавинные фотодиоды (APD) вместо классических ФЭУ, что даёт высокую чувствительность в компактном корпусе. CytoFLEX S - более универсальный прибор, VYB - более специализированный для PE/RFP-задач.
NovoCyte Quanteon - четырехлазерный анализатор (405/488/561/640 нм) с до 25 FL-каналами. Покрывает все спектральные области, включая и желто-зеленую (561 нм), и красную (640 нм). По мультипараметричности существенно превосходит VYB. NovoCyte Quanteon - более крупный и дорогой прибор. VYB может рассматриваться как более доступная альтернатива при отсутствии потребности в красном лазере.
Частые вопросы
Почему на MACSQuant VYB отсутствует красный лазер и какие флуорохромы из-за этого недоступны?
Отсутствие красного лазера (633-640 нм) - сознательный выбор Miltenyi в пользу желто-зеленого лазера 561 нм. Это делает невозможным использование APC, APC-Cy7, APC-H7, APC-Vio770, Alexa Fluor 647/700 и других флуорохромов, возбуждаемых красным лазером. Перед выбором VYB необходимо убедиться, что текущие протоколы лаборатории не зависят критически от APC-канала, либо быть готовым к перестройке панелей на PE-тандемные конъюгаты и BV-флуорохромы.
В чем конкретное преимущество лазера 561 нм перед 488 нм для PE?
Фикоэритрин (PE) имеет широкий спектр поглощения с максимумом около 565 нм. При возбуждении лазером 488 нм используется лишь восходящий хвост спектра поглощения - эффективность составляет примерно 50-60% от максимума. Лазер 561 нм попадает практически в пик поглощения, с приростом яркости в 1,5-2 раза. Для слабо экспрессированных маркеров, детектируемых PE-конъюгатами, это может определять возможность разрешения популяций.
Можно ли использовать MACSQuant VYB для стандартного иммунофенотипирования?
Да, но с ограничениями. Стандартные панели на основе FITC/PE/APC/APC-Cy7 необходимо адаптировать: APC-конъюгаты следует заменить на PE-тандемы (PE-Cy5, PE-Cy7) или BV-флуорохромы (BV421, BV510). Miltenyi предлагает альтернативные антитела в конъюгатах, совместимых с VYB. Для базового CD3/CD4/CD8 фенотипирования перестройка панели не представляет сложности, но для сложных мультипараметрических панелей замена APC-канала может потребовать значительной оптимизации.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.