Agilent NovoCyte Quanteon
Проточный цитометр-анализатор среднего класса с 4 лазерами (405, 488, 561, 640 нм) и до 25 параметров. Четвёртый жёлто-зелёный лазер 561 нм даёт лучшее возбуждение PE (561 нм ближе к максимуму абсорбции PE, чем 488 нм) и PE-тандемов. Перистальтический насос для абсолютного подсчёта клеток. NovoSampler Pro. ПО NovoExpress.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Настольный проточный цитометр-анализатор |
| Масса | ~37 кг |
| Лазеры | 4: 405, 488, 561, 640 нм |
| Форм-фактор | Настольный |
| Формат данных | FCS 3.0 / 3.1 |
| Автозагрузчик | NovoSampler Pro (96-луночные планшеты, стрипы, пробирки) |
| Объёмный подсчёт | Да, перистальтический насос (без калибровочных бус) |
| Скорость анализа | До 35 000 событий/сек |
| Параметры детекции | До 25 (23 FL + FSC + SSC) |
| Флуоресцентные каналы | До 23 |
| Программное обеспечение | NovoExpress |
Описание
Назначение
Agilent NovoCyte Quanteon - проточный цитометр-анализатор среднего класса, занимающий центральное положение в линейке NovoCyte. Прибор разработан для лабораторий, которым недостаточно возможностей базовых 3-лазерных систем, но не требуется максимальная размерность панелей.
Место в линейке
Quanteon располагается между базовым NovoCyte (до 3 лазеров, 13 параметров) и старшим Penteon (5 лазеров, 30+ параметров). Модель Advanteon - модернизация Quanteon с улучшенной чувствительностью при той же лазерной конфигурации.
Все модели объединены общей архитектурой: перистальтический насос, ПО NovoExpress, совместимость с NovoSampler.
Принцип работы
Классическая фильтровая оптическая схема: 4 лазера возбуждают флуоресценцию, сигнал регистрируется через полосовые фильтры детекторами. Матричная компенсация корректирует перетоки между каналами.
Ключевое отличие от базового NovoCyte - четвёртый лазер 561 нм. Он даёт лучшее возбуждение PE (561 нм ближе к максимуму абсорбции PE, чем 488 нм) и PE-тандемов, увеличивая яркость PE-сигнала на 30-40% по сравнению с возбуждением 488 нм.
Позиция на рынке
Quanteon востребован в core-facility и крупных исследовательских лабораториях, работающих с панелями из 10-20 маркеров. Прибор конкурирует с Beckman Coulter CytoFLEX S, Thermo Fisher Attune NxT и BD FACSCanto II.
Совместимость с реагентами любых производителей (BD, BioLegend, Miltenyi, Thermo Fisher) даёт гибкость в выборе антител без привязки к одному поставщику.
Ключевые технологии
Четырёхлазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV650, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Жёлто-зелёный | 561 нм | PE, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7, PE-Dazzle 594 |
| Красный | 640 нм | APC, APC-Cy7, APC-R700, Alexa Fluor 700 |
Фиолетовый лазер возбуждает Brilliant Violet - семейство ярких полимерных красителей, ставших стандартом в современных панелях. Жёлто-зелёный лазер расширяет доступ к красителям, неэффективно возбуждаемым 488 нм (mCherry, dsRed).
Расширенная детекция (до 25 параметров)
23 флуоресцентных канала + FSC + SSC позволяют строить панели из 15-20 маркеров с резервными каналами для контроля жизнеспособности и маркеров исключения (dump channel).
Для сравнения: базовый NovoCyte ограничен 13 параметрами (8-10-цветные панели). Quanteon удваивает число доступных маркеров.
Перистальтический насос
Фирменная технология линейки NovoCyte. Прецизионный насос точно отмеряет объём образца, для абсолютного подсчёта клеток (клеток/мл) без калибровочных бус.
Особенно ценно для клинических приложений, где абсолютное количество клеток (CD4+ T-лимфоциты/мкл) имеет диагностическое значение. Сниженный расход sheath-жидкости: 20-литрового контейнера хватает на 2-3 недели.
Высокая чувствительность детекторов
Quanteon использует детекторы SiPM (кремниевые фотоумножители) в сочетании с оптимизированной оптикой. Чувствительность по FITC составляет <80 MESF (Molecules of Equivalent Soluble Fluorochrome), что сопоставимо с системами на базе ФЭУ.
Высокая чувствительность критична для детекции слабо экспрессируемых маркеров: цитокинов, хемокиновых рецепторов, транскрипционных факторов.
NovoSampler Pro
Автозагрузчик, совместимый с 96-луночными планшетами (U-, V-, плоскодонные), стрипами и одиночными пробирками. Поддерживает перемешивание, регулируемый объём загрузки, обратную промывку между образцами.
Три предустановленных скорости загрузки: ~14 мкл/мин (высокое разрешение), ~35 мкл/мин (стандарт), ~66 мкл/мин (быстрый скрининг).
Для кого подходит
- Иммунология и иммуноонкология - расширенное иммунофенотипирование 15-20 маркеров, субпопуляции Treg, Th1/Th2/Th17, MDSC, NK
- Внутриклеточная цитокинометрия - многоцветный анализ IFN-g, TNF-a, IL-2, IL-4, IL-17 (требует 12+ параметров и хорошего возбуждения PE)
- Клеточная терапия - характеризация CAR-T, контроль качества клеточных препаратов, мониторинг дифференцировки
- Трансляционные исследования - стандартизованные панели для мониторинга иммунного ответа, фармакодинамические маркеры
- Анализ пролиферации - отслеживание деления клеток (CFSE, CellTrace Violet) с одновременным фенотипированием
- Анализ апоптоза - расширенные панели (Annexin V + маркер жизнеспособности + фенотипические маркеры) для определения апоптозирующих субпопуляций
- Высокопроизводительный скрининг - автоматическая обработка 96-луночных планшетов через NovoSampler Pro
- Анализ клеточного цикла - PI/DAPI с одновременным фенотипированием при оптимальном разрешении (низкая скорость загрузки)
Особенности эксплуатации
ПО
NovoExpress - программное обеспечение с расширенными аналитическими модулями. Автоматическая матричная компенсация по одноцветным контролям, визуализация компенсационной матрицы, многопараметрические гейты.
Модуль пролиферации (CFSE/CTV-разведение), модуль клеточного цикла (Dean-Jett-Fox, Watson Pragmatic), агрегация данных из нескольких экспериментов. Экспорт в FCS 3.0/3.1, совместимость с FlowJo, FCS Express, Cytobank.
Установка
- Форм-фактор: настольный, ~37 кг
- Температура: 18-25°C
- Подвод сжатого воздуха не требуется
- Специальных помещений не требуется
- Электропитание: стандартная сеть
Обслуживание
Ежедневная процедура: автопромывка (3-5 минут) + калибровка с QC-бусами (5-10 минут). NovoExpress автоматически строит графики Леви-Дженнингса для мониторинга QC.
Еженедельная глубокая очистка (deep clean), ежегодное плановое ТО с заменой фильтров и калибровкой лазеров. Расходные материалы: sheath-жидкость, промывочный раствор, QC-бусы.
Обучение
Работа с 15-20-цветными панелями требует квалифицированного подхода: подбор пар "антитело - флуорохром" с учётом экспрессии и спектрального перекрытия, одноцветные контроли, FMO-контроли для корректного гейтирования.
Для начинающих стоит начинать с 8-10-цветных панелей и постепенно увеличивать сложность. Базовое обучение: 2-3 дня.
Ограничения
- Отсутствие УФ-лазера (355 нм) исключает работу с BUV-красителями
- Максимум 25 параметров (для 30+ нужен Penteon)
- Фиксированные оптические фильтры ограничивают настройку под нестандартные красители
- Классическая (не спектральная) детекция: компенсация, а не unmixing
- Только анализ, функция сортировки отсутствует
Области применения
Сравнение с аналогами
CytoFLEX S - основной конкурент: 4 лазера (405, 488, 561, 638 нм), до 13 цветов (15 параметров). По каналам Quanteon имеет больше (25 vs 15). CytoFLEX S имеет модульную оптику с заменой фильтров пользователем - большая гибкость для нестандартных красителей. Quanteon оснащён объёмным подсчётом без бус и, как правило, предлагает более привлекательную цену.
Attune NxT - 4 лазера (405, 488, 561, 638 нм), до 16 параметров (14 FL). Ключевое отличие - акустическая фокусировка для разведённых образцов с высокой скоростью. Quanteon значительно имеет больше по каналам (25 vs 16). Attune NxT предпочтительнее для редких событий при низкой концентрации образца.
FACSCanto II - один из наиболее распространённых цитометров: 2-3 лазера (405/488/633 нм), до 10 параметров (8 FL). Установленная база огромна, особенно в клинике. Quanteon имеет больше по всем характеристикам: больше лазеров (4 vs 3), каналов (25 vs 10), встроенный объёмный подсчёт. FACSCanto II обладает клинической валидацией (CE-IVD) и большим количеством опубликованных протоколов.
Частые вопросы
Зачем нужен четвёртый лазер 561 нм, если PE возбуждается и 488 нм?
Формально PE поглощает свет при 488 нм, однако пик поглощения лежит вблизи 565 нм. При возбуждении 561 нм яркость PE-сигнала возрастает на 30-40%. Для слабо экспрессируемых маркеров (цитокины, хемокиновые рецепторы) это различие определяет, будет ли популяция разрешена от фона. Кроме того, выделенный 561 нм лазер снижает спектральное перекрытие PE и FITC.
Совместим ли Quanteon с реагентами BD Biosciences (Brilliant Violet, BUV)?
Brilliant Violet (BV) красители полностью совместимы - они возбуждаются 405 нм лазером. Красители BUV-семейства (BUV395, BUV496, BUV661 и др.) требуют УФ-лазера 355 нм, которого в Quanteon нет. Для BUV-панелей необходим NovoCyte Penteon. Многие опубликованные протоколы из BD-лабораторий включают BUV-красители - это важно учитывать при планировании.
Можно ли использовать данные Quanteon совместно с FlowJo?
Да. Quanteon экспортирует данные в формате FCS 3.0/3.1, полностью совместимом с FlowJo, FCS Express, Cytobank и другими платформами. Для продвинутого анализа (tSNE, UMAP, FlowSOM) пользователи обычно переходят на FlowJo с плагинами или R-пакеты (CytoExploreR, CATALYST).
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.