Agilent ZORBAX
Полная линейка колонок для ВЭЖХ/УВЭЖХ. 10+ серий: Eclipse Plus (универсальная), StableBond (pH 1-8), Extend-C18 (pH до 11,5), Bonus-RP (100% водные), 300SB (белки). Фазы: C18, C8, CN, Phenyl, Aq, HILIC. Частицы 1,8-7 мкм. ID 2,1-9,4 мм. Совместимы с любым ВЭЖХ.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Колонки для ВЭЖХ/УВЭЖХ (силикагелевая основа) |
| Поры | 80 A (стандартные), 100 A (HILIC), 300 A (белки) |
| Фазы | C18, C8, C3, CN, Phenyl-Hexyl, Aq, NH₂, SIL |
| Длина | 30-250 мм |
| Резьба | 10-32 (аналитические), 7/16-20 (полупреп.) |
| Серии RP | Eclipse Plus, Eclipse XDB, StableBond, Extend-C18, Bonus-RP, Eclipse PAH |
| pH-диапазон | 1-11,5 (зависит от серии) |
| Серии NP/HILIC | Rx-SIL, NH2, HILIC Plus |
| Макс. давление | 1200 бар (RRHD 2,1 мм), 600 бар (3,5 мм), 400 бар (5 мкм) |
| Совместимость | Любой ВЭЖХ/УВЭЖХ (Agilent, Waters, Shimadzu, Thermo) |
| Размеры частиц | 1,8 (RRHD), 3,5 (RRHT), 5, 7 мкм |
| Серии для белков | 300SB (C18/C8/C3/CN), 300Extend-C18 |
| Внутренний диаметр | 2,1 / 3,0 / 4,6 / 9,4 мм |
Описание
О производителе
Agilent Technologies (Санта-Клара, Калифорния) - одна из крупнейших компаний в области аналитического приборостроения. Бренд ZORBAX существует с 1975 года, когда компания DuPont (позднее Rockland Technologies, затем Mac-Mod Analytical) начала производство колонок на основе сферического силикагеля. В 2000 году Agilent приобрела линейку ZORBAX.
На сегодняшний день ZORBAX - один из наиболее цитируемых брендов колонок в фармакопейных монографиях (USP, EP, JP). Тысячи валидированных методов во всём мире основаны на колонках ZORBAX.
Стандарты и сертификаты
Каждая колонка ZORBAX поставляется с сертификатом качества (Certificate of Analysis), включающим тестовую хроматограмму. Серийный номер и номер партии силикагеля прослеживаются до производственной серии. Производство соответствует ISO 9001.
Обзор линейки ZORBAX
Линейка ZORBAX включает более 10 серий колонок для обращённо-фазовой (RP), нормально-фазовой (NP), HILIC и ионообменной хроматографии. Серии различаются химией поверхности силикагеля, pH-стабильностью и селективностью.
Серии обращённо-фазовых (RP) колонок
| Серия | Фазы | pH-диапазон | Особенность | Частицы (мкм) |
|---|---|---|---|---|
| Eclipse Plus | C18, C8, Phenyl-Hexyl, CN | 2-9 | Универсальная, двойное эндкеппирование, симметричные пики | 1,8 / 3,5 / 5 |
| Eclipse XDB | C18, C8, Phenyl, CN | 2-9 | Extra Dense Bonding, минимальная активность силанолов | 1,8 / 3,5 / 5 |
| StableBond (SB) | C18, C8, C3, CN, Phenyl, Aq | 1-8 | Стерическая защита силоксановой связи, стабильность при низком pH | 1,8 / 3,5 / 5 / 7 |
| Extend-C18 | C18 | 2-11,5 | Bidentate-связывание, стабильность при высоком pH | 1,8 / 3,5 / 5 |
| Bonus-RP | C14 с амидной группой | 2-9 | Встроенная полярная группа, 100% водные подвижные фазы | 1,8 / 3,5 / 5 |
| Eclipse PAH | C18 (высокая селективность к PAH) | 2-8 | Для полициклических ароматических углеводородов (EPA 610, 8310) | 3,5 / 5 |
| Rx-C18/Rx-C8 | C18, C8 | 2-8 | Высокоочищенный силикагель (>99,995%), повышенная загрузка углеродом | 5 |
Серии для нормальной фазы, HILIC и белков
| Серия | Фаза | Назначение |
|---|---|---|
| Rx-SIL | Голый силикагель (80 A) | Нормальная фаза, адсорбционная хроматография |
| NH2 | Аминопропил | Нормальная фаза, сахара |
| HILIC Plus | Голый силикагель (100 A, 200 м²/г) | HILIC для полярных и заряженных соединений |
| 300SB-C18/C8/C3/CN | C18, C8, C3, CN (300 A) | Белки и пептиды (широкопористый, 300 A) |
| 300Extend-C18 | C18 (300 A) | Белки при высоком pH |
Eclipse Plus
Eclipse Plus - самая универсальная серия ZORBAX. Двойное эндкеппирование (double endcapping) максимально снижает активность остаточных силанольных групп. Результат - симметричные пики для кислых, нейтральных и основных соединений в диапазоне pH 2-9.
Когда выбирать Eclipse Plus
Eclipse Plus - колонка первого выбора для разработки нового метода. Если природа аналита неизвестна или аналиты включают и кислоты, и основания, Eclipse Plus C18 с наибольшей вероятностью даст хорошее разделение.
При недостаточной селективности на C18 переход на Eclipse Plus C8 (меньше гидрофобного удерживания), Phenyl-Hexyl (пи-пи взаимодействия с ароматикой) или CN (минимальное удерживание, быстрое элюирование) часто решает задачу без смены производителя и метода валидации.
Доступные фазы Eclipse Plus
| Фаза | Углеродная загрузка | USP-код | Применение |
|---|---|---|---|
| C18 | 9% | L1 | Универсальная, гидрофобные соединения |
| C8 | 7% | L7 | Менее гидрофобные, быстрое элюирование |
| Phenyl-Hexyl | 9% | L11 | Ароматические соединения, пи-пи селективность |
| CN | 5% | L10 | Полярные соединения, минимальное удерживание |
Размеры Eclipse Plus
| ID (мм) | Длина (мм) | Частицы 1,8 мкм (RRHD) | Частицы 3,5 мкм (RRHT) | Частицы 5 мкм |
|---|---|---|---|---|
| 2,1 | 50 | 959757-902 | 959741-902 | 959701-902 |
| 2,1 | 100 | 959758-902 | 959742-902 | - |
| 2,1 | 150 | 959759-902 | 959743-902 | 959701-902 |
| 3,0 | 100 | 959758-302 | 959742-302 | - |
| 3,0 | 150 | 959759-302 | 959743-302 | 959975-302 |
| 4,6 | 50 | 959964-902 | 959943-902 | 959946-902 |
| 4,6 | 100 | 959964-902 | 959943-902 | 959990-902 |
| 4,6 | 150 | 959967-902 | 959943-902 | 959993-902 |
| 4,6 | 250 | - | - | 959990-902 |
Приведены артикулы для фазы C18. Для C8, Phenyl-Hexyl и CN артикулы отличаются последними цифрами после дефиса (C8: -906, Phenyl-Hexyl: -912, CN: -905).
Максимальное давление
- 1,8 мкм (RRHD): 1200 бар (ID 2,1 и 3,0 мм) / 600 бар (ID 4,6 мм)
- 3,5 мкм: 600 бар
- 5 мкм: 400 бар
Предколонки (Guard Columns)
Для защиты аналитической колонки доступны предколонки Eclipse Plus с идентичной фазой. Формат: 4,6 x 12,5 мм (для аналитических 4,6 мм ID) и 2,1 x 5 мм (для УВЭЖХ 2,1 мм ID). Предколонка увеличивает срок службы основной колонки в 2-5 раз.
StableBond (SB)
StableBond - серия для работы при низком pH (до pH 1). Стерическая защита: объёмные диизобутильные (SB-C18) или диизопропильные (остальные фазы) боковые группы физически экранируют силоксановую связь Si-O-Si от гидролиза кислотой.
Когда выбирать StableBond
StableBond необходима, когда подвижная фаза содержит 0,1% трифторуксусной кислоты (TFA) или фосфорную кислоту при pH < 2. В таких условиях обычные колонки (Eclipse Plus, XDB) быстро деградируют - теряют удерживание за недели. StableBond SB-C18 сохраняет характеристики тысячи инъекций при pH 1.
SB-Aq - отдельная фаза для 100% водных подвижных фаз. Обычные C18-колонки при работе без органического растворителя «схлопываются» (dewetting) - привитые цепи слипаются, удерживание падает. SB-Aq модифицирована полярной группой, предотвращающей этот эффект.
Доступные фазы StableBond
| Фаза | Углеродная загрузка | USP-код | pH-диапазон | Особенность |
|---|---|---|---|---|
| SB-C18 | 10% | L1 | 1-8 | Максимальное удерживание при низком pH |
| SB-C8 | 5,5% | L7 | 1-8 | Среднее удерживание |
| SB-C3 | 3% | L13 | 1-8 | Минимальное гидрофобное удерживание |
| SB-CN | 5% | L10 | 1-8 | Полярная селективность |
| SB-Phenyl | 5% | L11 | 1-8 | Ароматическая селективность |
| SB-Aq | 5% | L60 | 1-8 | 100% водные подвижные фазы |
Размеры StableBond
Доступны во всех стандартных конфигурациях:
| ID (мм) | Длина (мм) | 1,8 мкм | 3,5 мкм | 5 мкм | 7 мкм (преп.) |
|---|---|---|---|---|---|
| 2,1 | 30 | да | - | - | - |
| 2,1 | 50 | да | да | да | - |
| 2,1 | 100 | да | да | - | - |
| 2,1 | 150 | да | да | да | - |
| 3,0 | 50 | да | да | - | - |
| 3,0 | 100 | да | да | - | - |
| 3,0 | 150 | да | да | да | - |
| 4,6 | 50 | да | да | да | - |
| 4,6 | 75 | - | да | да | - |
| 4,6 | 100 | - | да | да | - |
| 4,6 | 150 | да | да | да | - |
| 4,6 | 250 | - | да | да | - |
| 9,4 | 250 | - | - | да | да |
Extend-C18
Extend-C18 - серия для работы при высоком pH (до pH 11,5). Технология бидентатного связывания (bidentate bonding): лиганд C18 прикреплён к силикагелю двумя связями вместо одной. Вторая связь образует мостик между соседними силанольными группами, закрывая поверхность от атаки основаниями.
Когда выбирать Extend-C18
Extend-C18 необходима для анализа основных соединений при pH 8-11,5. При высоком pH основания находятся в нейтральной форме, что улучшает форму пиков и удерживание. Фармакопейные методы для ряда субстанций (амитриптилин, лидокаин, дифенгидрамин) специфицируют буферы pH 9-10, где обычные C18-колонки деградируют.
Размеры Extend-C18
| ID (мм) | Длина (мм) | 1,8 мкм (RRHD) | 3,5 мкм | 5 мкм |
|---|---|---|---|---|
| 2,1 | 50 | да | да | - |
| 2,1 | 100 | да | да | - |
| 2,1 | 150 | да | да | да |
| 3,0 | 100 | да | да | - |
| 3,0 | 150 | да | да | да |
| 4,6 | 50 | да | да | да |
| 4,6 | 100 | - | да | да |
| 4,6 | 150 | да | да | да |
| 4,6 | 250 | - | да | да |
Bonus-RP
Bonus-RP - колонка с встроенной полярной группой (embedded polar group). Амидная группа встроена в C14-алкильную цепь. Полярная группа «экранирует» силанольные группы силикагеля водородными связями, снижая их активность по отношению к основным аналитам.
Когда выбирать Bonus-RP
Два сценария:
- Основные соединения с хвостящими пиками на обычном C18 - Bonus-RP часто устраняет хвостирование без изменения pH или добавления модификаторов
- 100% водная подвижная фаза - Bonus-RP, как и SB-Aq, сохраняет смачиваемость при 100% воде. Это критично для полярных метаболитов, водорастворимых витаминов и аминокислот без дериватизации
Характеристики Bonus-RP
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Лиганд | C14 с амидной группой |
| Углеродная загрузка | 10% |
| Пора | 80 A |
| pH-диапазон | 2-9 |
| USP-код | L68 |
| Частицы | 1,8 / 3,5 / 5 мкм |
Eclipse XDB
Eclipse XDB (Extra Dense Bonding) - серия с повышенной плотностью привитого лиганда и тройным эндкеппированием. XDB предшествовала Eclipse Plus и остаётся в ассортименте для обратной совместимости с валидированными методами.
Отличие от Eclipse Plus
Eclipse Plus использует более новую технологию поверхности (MaxBond), которая снижает активность силанолов эффективнее XDB. Для новых методов предпочтительнее Eclipse Plus. XDB закупается, когда метод уже валидирован на XDB и нет основания для перевалидации.
Доступные фазы XDB
| Фаза | Углеродная загрузка | USP-код |
|---|---|---|
| XDB-C18 | 10% | L1 |
| XDB-C8 | 6,5% | L7 |
| XDB-Phenyl | 6% | L11 |
| XDB-CN | 5% | L10 |
Eclipse PAH
Eclipse PAH - специализированная колонка для полициклических ароматических углеводородов (PAH). Оптимизированная селективность даёт возможность разделить все 16 PAH по EPA 610/8310 за один анализ, включая критическую пару бенз[b]флуорантен / бенз[k]флуорантен.
Доступна в размерах 4,6 x 50/100/150 мм с частицами 3,5 и 5 мкм.
Колонки для HILIC и нормальной фазы
HILIC Plus
HILIC Plus - голый силикагель с порами 100 A и площадью поверхности 200 м2/г. Предназначена для HILIC-хроматографии: разделение полярных и заряженных соединений (аминокислоты, нуклеотиды, сахара, органические кислоты) в режиме гидрофильных взаимодействий.
Подвижная фаза: 50-95% ацетонитрила + аммонийный буфер. Элюирование в порядке возрастания полярности (обратный по отношению к RP-ВЭЖХ).
Rx-SIL
Rx-SIL - голый силикагель (80 A) для классической нормально-фазовой хроматографии с неполярными подвижными фазами (гексан, гептан, дихлорметан). Высокочистый силикагель (>99,995%) минимизирует неспецифическую адсорбцию.
NH2
Аминопропильная фаза для анализа сахаров методом нормальной фазы. Подвижная фаза: ацетонитрил/вода. Разделяет моно- и дисахариды с хорошей селективностью. Ограничение: аминогруппа реагирует с альдегидами (деградация при длительной работе с восстанавливающими сахарами).
Широкопористые колонки (300 A)
300SB (для белков и пептидов)
Серия 300SB имеет поры 300 A (vs 80 A у стандартных). Крупные молекулы (белки, пептиды, антитела) не проникают в поры 80 A - их разделение на стандартных колонках неэффективно. Поры 300 A вмещают молекулы до 100-200 кДа.
Доступные фазы: 300SB-C18, 300SB-C8, 300SB-C3, 300SB-CN.
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Пора | 300 A |
| Частицы | 3,5 / 5 мкм |
| pH-диапазон | 1-8 |
| ID | 2,1 / 4,6 мм |
| Длина | 50-150 мм |
| Применение | Пептидное картирование, интактные белки, mAb |
300Extend-C18
Широкопористый аналог Extend-C18 для белков при высоком pH. Стабилен до pH 11,5. Используется для анализа моноклональных антител (mAb) в условиях, где кислый pH вызывает агрегацию.
Как выбрать колонку ZORBAX
Выбор серии и фазы определяется четырьмя факторами:
1. pH подвижной фазы
| pH | Серия |
|---|---|
| 1-2 | StableBond (SB) |
| 2-8 | Eclipse Plus (первый выбор) или Eclipse XDB |
| 8-11,5 | Extend-C18 |
| Любой | Bonus-RP (если нужна 100% вода) |
2. Природа аналита
| Аналит | Фаза |
|---|---|
| Гидрофобные (лекарства, липиды, PAH) | C18 |
| Умеренно полярные | C8 |
| Ароматические (с пи-пи взаимодействиями) | Phenyl-Hexyl |
| Полярные (быстрое элюирование) | CN |
| Очень полярные (в воде) | Bonus-RP или SB-Aq |
| Полярные заряженные (аминокислоты) | HILIC Plus |
| Белки и пептиды | 300SB-C18/C8/C3 |
3. Размер частиц
| Частицы | Давление (макс.) | Когда использовать |
|---|---|---|
| 1,8 мкм (RRHD) | 1200 бар | УВЭЖХ (Agilent 1290), максимальная эффективность |
| 3,5 мкм (RRHT) | 600 бар | Быстрые анализы на стандартном ВЭЖХ (Agilent 1260) |
| 5 мкм | 400 бар | Рутинный QC, валидированные методы фармакопей |
| 7 мкм | 200 бар | Препаративная хроматография |
4. Внутренний диаметр
| ID | Расход (типичный) | Когда использовать |
|---|---|---|
| 2,1 мм | 0,2-0,6 мл/мин | УВЭЖХ, ЖХ-МС, экономия растворителей |
| 3,0 мм | 0,4-1,0 мл/мин | Компромисс между чувствительностью и загрузкой |
| 4,6 мм | 0,8-2,0 мл/мин | Стандартный ВЭЖХ, рутинный QC, фармакопеи |
| 9,4 мм | 4-10 мл/мин | Полупрепаративная очистка |
Совместимость с оборудованием
Колонки ZORBAX оснащены стандартными фитингами и совместимы с ВЭЖХ/УВЭЖХ любого производителя:
| Производитель | Совместимые системы |
|---|---|
| Agilent | 1220, 1260 Infinity II, 1290 Infinity II |
| Waters | Alliance, ACQUITY UPLC, ACQUITY PREMIER |
| Shimadzu | Prominence-i, Nexera LC-40, Nexera X3 |
| Thermo | Vanquish Core, Flex, Horizon |
Для УВЭЖХ-систем с давлением до 1200 бар (Agilent 1290, Waters ACQUITY, Shimadzu Nexera) используются колонки RRHD (1,8 мкм). Для стандартных ВЭЖХ (до 400-600 бар) - колонки 3,5 и 5 мкм.
Резьба: стандартная 10-32 (аналитические) или 7/16-20 (полупреп 9,4 мм).
Области применения
Сравнение с аналогами
ACQUITY BEH (Bridged Ethylene Hybrid) - колонки на основе гибридного органо-силикагельного сорбента с порами 130 A. BEH стабильнее ZORBAX при высоком pH (до pH 12 vs 11,5 у Extend). ZORBAX имеет более широкий выбор фаз (10+ серий vs 4 у BEH) и больше конфигураций по размерам. BEH оптимизированы под Waters ACQUITY, но совместимы с другими УВЭЖХ. Для пользователей Waters - BEH. Для Agilent или мультивендорных лабораторий - ZORBAX.
Kinetex - колонки на основе поверхностно-пористых (core-shell) частиц 1,3-5 мкм. Core-shell частицы дают на 30-50% более высокую эффективность при том же давлении по сравнению с полностью пористыми частицами ZORBAX. Kinetex быстрее при рутинных анализах. ZORBAX имеет значительно большую базу валидированных фармакопейных методов. Для высокой производительности - Kinetex. Для фармакопейного QC - ZORBAX.
Hypersil GOLD - линейка колонок на высокочистом силикагеле с частицами 1,9-5 мкм. По химии поверхности сопоставим с Eclipse Plus. Hypersil GOLD интегрирован в методные базы Thermo (Chromeleon). ZORBAX имеет более широкий ассортимент (специализированные серии: PAH, Bonus-RP, 300SB). Для пользователей Thermo - Hypersil GOLD. Для мультивендорных лабораторий и широкого спектра задач - ZORBAX.
Частые вопросы
Eclipse Plus или StableBond - что выбрать?
Eclipse Plus - колонка первого выбора для pH 2-9, даёт симметричные пики для большинства соединений. StableBond нужна при pH ниже 2 (TFA 0,1%, фосфорная кислота). При pH 1 Eclipse Plus деградирует за недели, StableBond работает тысячи инъекций. Для стандартных условий (ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота, pH 2,5-3) Eclipse Plus достаточна.
Можно ли использовать ZORBAX на УВЭЖХ не Agilent (Waters, Shimadzu)?
Да. Колонки ZORBAX оснащены стандартными фитингами 10-32 и совместимы с УВЭЖХ любого производителя. RRHD-колонки (1,8 мкм) рассчитаны на 1200 бар - подходят для Waters ACQUITY, Shimadzu Nexera, Thermo Vanquish. Единственное ограничение: Agilent использует фитинги с прижимным кольцом, что требует правильного затягивания. Мёртвый объём при неправильном подключении ухудшает эффективность.
Как продлить срок службы колонки?
Три правила: (1) предколонка - увеличивает ресурс в 2-5 раз, стоимость 10-15% от колонки. (2) Фильтрация образцов через 0,22 мкм перед инъекцией. (3) Промывка: после работы с буферами промыть 20 объёмами колонки водой, затем 10 объёмами ацетонитрила. Хранение: в ацетонитриле или ацетонитрил/вода 80:20.
Eclipse Plus или Eclipse XDB - в чём разница?
Eclipse Plus использует более новую технологию обработки поверхности (MaxBond + двойное эндкеппирование). XDB (Extra Dense Bonding) - предыдущее поколение с тройным эндкеппированием. Для новых методов Eclipse Plus предпочтительнее - лучшая симметрия пиков, особенно для оснований. XDB остаётся в ассортименте для обратной совместимости с валидированными методами.
Какую колонку выбрать для ЖХ-МС?
Для ЖХ-МС (масс-спектрометрический детектор): ID 2,1 мм (расход 0,2-0,5 мл/мин), частицы 1,8 мкм (RRHD). Фаза: Eclipse Plus C18 для большинства задач. Подвижная фаза: ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота (летучий буфер, совместим с ESI). Фосфатные буферы для МС не подходят (неионизуемые). Для белков: 300SB-C8 или 300SB-C3.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.