BD FACSymphony A3
Проточный цитометр-анализатор среднего класса линейки FACSymphony. До 4 лазеров (405, 488, 561, 640 нм), до 30 параметров детекции. Мост между компактным A1 и старшим A5, подходящый для мультипараметрического иммунофенотипирования и трансляционных исследований. ПО BD FACSDiva.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Проточный цитометр-анализатор (конвенциональная детекция) |
| Лазеры | До 4: 405 нм (фиолетовый), 488 нм (синий), 561 нм (жёлто-зелёный), 640 нм (красный) |
| Детекторы | PMT (фотоумножители), 24-бит цифровая обработка |
| Калибровка | CS&T (Cytometer Setup and Tracking) |
| Форм-фактор | Напольная/настольная система среднего размера |
| Модульность | Да (добавление лазеров, замена фильтров и детекторных блоков) |
| Формат данных | FCS 3.1 |
| Проточная ячейка | Кварцевая кювета с гидродинамической фокусировкой |
| Скорость анализа | До 35 000 событий/сек |
| Загрузка образцов | Пробирки 12x75 мм, опционально HTS (96/384-лунки) |
| Параметры детекции | До 30 (включая FSC и SSC) |
| Технология детекции | Конвенциональная (фильтровая), матричная компенсация |
| Оптическая платформа | Унифицирована с FACSymphony A1/A5, модульные фильтры |
| Динамический диапазон | ~7.2 декады |
| Программное обеспечение | BD FACSDiva |
Описание
Назначение
BD FACSymphony A3 - проточный цитометр-анализатор среднего класса линейки FACSymphony. Прибор предназначен для мультипараметрического анализа с 15-25 маркерами без затрат на максимальную конфигурацию уровня A5.
Место в линейке
A3 занимает промежуточную позицию между начальным A1 (до 3 лазеров, до 16 параметров) и старшим A5 (до 5 лазеров, до 50 параметров). Ключевое отличие от A1 - наличие четвёртого лазера (561 нм), открывающего доступ к PE-тандемным красителям.
FACSymphony A3 пришёл на замену BD LSRFortessa X-20. Он предлагает больше параметров (до 30 vs до 20), улучшенную электронику и унификацию с линейкой FACSymphony.
Принцип работы
A3 использует классическую конвенциональную (фильтровую) схему детекции. Каждый флуоресцентный сигнал направляется через полосовой фильтр на индивидуальный PMT-детектор. Разделение перекрывающихся спектров выполняется матричной компенсацией.
Четыре лазера возбуждают флуорохромы на разных длинах волн. Расширенное число детекторных блоков даёт возможность регистрировать 26-28 флуоресцентных каналов одновременно.
Позиция на рынке
FACSymphony A3 адресован двум основным категориям пользователей. Первая - лаборатории на LSRFortessa или LSRFortessa X-20, нуждающиеся в модернизации. Вторая - новые исследовательские группы, проектирующие эксперименты с 20+ маркерами.
Прямые конкуренты: Cytek Aurora (спектральный подход, 40+ маркеров), Beckman Coulter CytoFLEX LX (до 6 лазеров, APD-детекторы).
Технологии
Четырёхлазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Жёлто-зелёный | 561 нм | PE, PE-CF594, PE-Cy5, PE-Cy5.5, PE-Cy7 |
| Красный | 640 нм | APC, APC-Cy7, APC-R700 |
Добавление 561 нм лазера - основное преимущество перед A1. Он даёт подходящее возбуждение PE и его тандемных конъюгатов, которые составляют значительную часть палитры для многоцветных панелей.
Отсутствие ультрафиолетового лазера (355 нм) ограничивает работу с красителями серии BUV (BUV395, BUV496, BUV661, BUV737, BUV805).
Расширенные детекторные блоки
До 30 параметров детекции (26-28 FL-каналов + FSC + SSC). Высокочувствительные PMT-детекторы с улучшенной квантовой эффективностью дают низкий порог детекции тусклых популяций.
24-битная цифровая обработка сигнала даёт динамический диапазон порядка 7.2 декады. В одном эксперименте можно регистрировать как ярко окрашенные популяции (CD3-FITC), так и тусклые маркеры (FoxP3 на регуляторных T-клетках).
Унифицированная оптическая платформа
Все модели FACSymphony используют общую архитектуру оптической скамьи. Панель, валидированная на A3, переносится на A5 (или частично на A1) без полной переоптимизации.
Модульность оптической конфигурации существенно выше, чем у A1. Пользователь может заменять дихроичные зеркала и полосовые фильтры для адаптации под нестандартные красители или флуоресцентные белки.
Высокопроизводительная загрузка образцов
Опциональный модуль HTS (High Throughput Sampler) даёт автоматизированную загрузку из 96- и 384-луночных планшетов. Скорость анализа - до 35 000 событий в секунду.
HTS существенно повышает пропускную способность при скрининговых исследованиях и иммуномониторинге с большими когортами.
Для кого подходит
- Центры трансляционной медицины - глубокое иммунопрофилирование пациентов в рамках клинических исследований фаз I-III
- Онкоиммунология - анализ опухолевого микроокружения с панелями 18-25 маркеров (T-клетки, NK-клетки, макрофаги, MDSC, PD-1/PD-L1/CTLA-4)
- Вакцинология - мониторинг антиген-специфического иммунного ответа (MHC-тетрамеры + фенотип + функция)
- Гематология и стволовые клетки - анализ гемопоэтических предшественников (CD34+ субпопуляции), минимальная остаточная болезнь
- Лаборатории, переходящие с LSRFortessa / LSRFortessa X-20 - расширенное число параметров при сохранении знакомой программной среды
- Core-facility - центральная платформа для множества исследовательских групп с различными задачами
Особенности эксплуатации
Программное обеспечение
BD FACSDiva - стандартная среда управления прибором, сбора данных и первичного анализа. Поддерживает шаблоны экспериментов, автоматическую и ручную компенсацию, иерархическое гейтирование.
Данные сохраняются в формате FCS 3.1. Для продвинутого анализа панелей с 20+ маркерами рекомендуются FlowJo (с плагинами tSNE, UMAP, FlowSOM), OMIQ или Cytobank.
Требования к установке
- Форм-фактор: напольная или настольная система среднего размера
- Стабильный лабораторный стол или специализированная тумба
- Размещение вдали от источников вибраций (центрифуги, холодильные установки)
- Электропитание: стандартная сеть
Обслуживание и расходные материалы
Ежедневная калибровка с помощью CS&T beads занимает 15-20 минут (включая прогрев лазеров). Программа автоматически отслеживает дрейф параметров и формирует журнал контроля качества.
Расходные материалы: sheath-жидкость, промывочный раствор, калибровочные частицы, CompBeads для компенсации. Плановое сервисное обслуживание - раз в год.
Обучение
Базовое обучение от BD занимает 3-5 дней. Подготовка компенсационных матриц для панелей с 20+ маркерами - нетривиальная задача, требующая опыта.
Для корректной работы с большими панелями необходимы FMO-контроли (Fluorescence Minus One) для каждого маркера. Некорректная компенсация при 20+ параметрах приводит к артефактам, которые могут быть ошибочно интерпретированы как биологические различия.
Ограничения
- Нет ультрафиолетового лазера (355 нм) в стандартной конфигурации, семейство BUV-красителей недоступно
- Максимум 30 параметров - для панелей 30+ маркеров необходим A5
- Классическая фильтровая детекция не даёт возможность различать флуорохромы с близкими спектрами (в отличие от спектральных платформ)
- Расход sheath-жидкости выше, чем у компактных анализаторов с акустической фокусировкой
- Только анализ, функция сортировки отсутствует
Области применения
Сравнение с аналогами
Cytek Aurora - полноспектральный анализатор с 3-5 лазерами и до 64 детекторами, использующий спектральное разложение (unmixing) вместо классической фильтровой детекции. Aurora может различать значительно больше флуорохромов при том же числе лазеров - до 40+ маркеров при 5 лазерах. FACSymphony A3 использует классическую схему с дискретными фильтрами, что даёт прямолинейную валидацию и интерпретацию данных. Выбор: Aurora для максимального числа маркеров, A3 - для стандартизированных протоколов и совместимости с экосистемой BD.
LSRFortessa X-20 - предшественник FACSymphony A3 в линейке BD, до 5 лазеров и до 20 параметров. X-20 - хорошо зарекомендовавший себя прибор с огромной базой публикаций, но оптическая платформа предыдущего поколения уступает FACSymphony по чувствительности. A3 предлагает больше параметров, улучшенную электронику и перспективу масштабирования внутри FACSymphony. X-20 может быть предпочтителен при наличии большой библиотеки валидированных протоколов, специфичных для этого прибора.
CytoFLEX LX - старший анализатор Beckman Coulter, до 6 лазеров (включая 375 и 808 нм) и до 21 FL-каналов. Использует диодные детекторы (APD) вместо PMT, технологию WDM, компактный формат. LX даёт больше лазерных линий в меньшем корпусе, но число FL-каналов ниже, чем у A3 (21 vs ~28). FACSymphony A3 имеет по числу параметров и унификации платформы; CytoFLEX LX - по компактности и разнообразию лазерных линий.
Частые вопросы
Чем FACSymphony A3 отличается от LSRFortessa X-20, который он заменяет?
FACSymphony A3 построен на обновлённой оптической платформе с улучшенной чувствительностью и расширенным числом параметров (до 30 vs до 20 у X-20). Ключевые отличия: унифицированная с A1/A5 оптическая скамья (переносимость протоколов внутри линейки), обновлённая электроника с более широким динамическим диапазоном, поддержка большего числа лазеров. Программная среда (FACSDiva) остаётся знакомой пользователям LSRFortessa, что упрощает переход.
Можно ли на FACSymphony A3 работать с BUV-красителями?
Работа с BUV-красителями (Brilliant Ultraviolet) требует ультрафиолетового лазера 355 нм. В стандартной четырёхлазерной конфигурации A3 (405/488/561/640 нм) UV-лазер отсутствует. Возможность добавления 355 нм зависит от конкретной конфигурации - необходимо уточнять у представителя BD. Если панели с BUV-красителями являются приоритетом, стоит FACSymphony A5 с поддержкой до 5 лазеров, включая UV.
Какое ПО для анализа данных лучше использовать с FACSymphony A3?
BD FACSDiva даёт сбор данных и базовый анализ (компенсация, гейтирование). Для продвинутого анализа панелей с 20+ маркерами рекомендуются: FlowJo (BD) с поддержкой tSNE/UMAP/FlowSOM; OMIQ - облачная платформа с автоматизированным конвейером; Cytobank - облачная платформа с SPADE и viSNE. Для стандартизированных клинических панелей (6-10 маркеров) FACSDiva достаточна; для исследовательских высокопараметрических панелей FlowJo или OMIQ практически обязательны.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.