Bio-Rad S3e Cell Sorter

Назначение

Bio-Rad S3e - компактный настольный клеточный сортер, реализующий традиционную технологию сортировки по каплям (jet-in-air) в минимальных габаритах. Система предназначена для индивидуальных исследователей и небольших лабораторий, которым нужна классическая капельная сортировка без выделенного помещения и штатного оператора.

Место в линейке

S3e - единственный сортер Bio-Rad. Буква "e" обозначает расширенную (enhanced) версию оригинального S3, дополненную улучшенной оптикой и электроникой. Флагманский анализатор ZE5 (до 5 лазеров, 30 параметров) дополняет линейку для задач глубокого фенотипирования.

S3e занимает нишу: полноценный jet-in-air сортер с возможностями, ранее доступными только в крупных напольных системах, но в настольном форм-факторе.

Принцип работы

Клетки в ламинарном потоке проходят через сопло. Поток разбивается на капли ультразвуковым вибратором. Система детекции (2 лазера, 4 FL-канала) идентифицирует целевые клетки, соответствующие капли получают электрический заряд и отклоняются электрическим полем в сборные емкости.

Технология ProSort автоматически определяет задержку капель (drop delay) и отслеживает ее стабильность в реальном времени. Это устраняет наиболее сложный этап настройки jet-in-air сортера.

Позиция на рынке

S3e конкурирует с настольными сортерами начального уровня: BD FACSMelody (до 3 лазеров, 9 FL), Sony SH800S (чиповый, до 6 FL) и CytoFLEX SRT (микрочиповый, до 13 FL). По числу каналов уступает всем конкурентам, но компенсирует это минимальными габаритами и простотой.

S3e оптимален для лабораторий с базовыми задачами сортировки (2-3 маркера), где не требуется сложное многоцветное фенотипирование перед сортировкой.

Технологии

Капельная сортировка (jet-in-air)

S3e использует проверенный метод формирования капель и электростатического отклонения. Подход хорошо изучен и имеет обширную методическую базу.

Поддерживаются сопла 70 и 100 мкм. Сопло 70 мкм даёт лучшее разрешение для мелких клеток, 100 мкм - для крупных клеток и кластеров.

Технология ProSort

Автоматическая калибровка задержки капель (drop delay) - основная инновация Bio-Rad. В традиционных системах эта процедура выполняется вручную опытным оператором и является основным барьером для самостоятельного использования.

ProSort определяет задержку автоматически и корректирует ее в реальном времени при дрейфе. Ручная калибровка занимает 10-20 минут и требует значительного опыта; ProSort сокращает это до минуты.

Двухлазерная детекция

Синий лазер 488 нм возбуждает FITC, GFP, PE. Красный 640 нм - APC. Суммарно 4 FL-канала плюс FSC и SSC. Конфигурация достаточна для базовых задач сортировки по 2-3 маркерам.

Скромное количество каналов компенсируется простотой настройки панелей и минимальной компенсацией перетока сигнала.

Автоматический стартап и выключение

S3e выполняет процедуры промывки, деконтаминации и подготовки к работе автоматически. Это снижает вероятность ошибок оператора и экономит время.

Для кого подходит

• Небольшие исследовательские лаборатории - доступная капельная сортировка без core-лаборатории
• Иммунология - базовое фенотипирование и сортировка по 2-3 маркерам (CD4/CD8, B220)
• Клеточная биология - выделение GFP-положительных клеток после трансфекции
• Микробиология - сортировка бактерий и дрожжей по флуоресцентным репортерам
• Учебные лаборатории - обучение принципам проточной сортировки на полноценной, но простой системе
• Стволовые клетки - выделение субпопуляций при работе с небольшими объемами

Особенности эксплуатации

ПО

ProSort Software - программное обеспечение с пошаговым интерфейсом настройки эксперимента. Последовательность: запуск потока, калибровка лазеров, автоматическое определение drop delay, определение гейтов, запуск сортировки.

Данные экспортируются в формате FCS 3.0/3.1. Совместимость с FlowJo и другими программами анализа.

Установка

• Форм-фактор: самый компактный среди jet-in-air сортеров (около 45x60x60 см)
• Размещается на стандартном лабораторном столе
• Рекомендуется защита от вибраций и сквозняков для стабильности капель
• Температура: 18-25 C, влажность: 30-70%
• Открытая система генерирует аэрозоли; для BSL-2 стоит внешний аэрозольный контейнмент

Обслуживание

Расходные материалы: стандартные сопла (70 и 100 мкм), sheath-жидкость, калибровочные бусы. Стоимость расходных материалов ниже, чем у чип-сортеров.

Требуется регулярная промывка и деконтаминация проточной системы. Автоматические циклы промывки при включении и выключении упрощают ежедневное обслуживание.

Обучение

Минимальное обучение - 1-2 дня. ProSort автоматизирует наиболее сложную часть работы с jet-in-air сортером (калибровку drop delay), что существенно снижает порог входа.

Для самостоятельной работы оператор должен владеть базовыми навыками гейтирования и понимать принцип капельной сортировки.

Ограничения

• Только 4 FL-канала и 2 лазера: панели свыше 4 цветов невозможны
• Фиксированная конфигурация лазеров, аппаратное расширение не поддерживается
• Нет фиолетового лазера (405 нм): BV421, DAPI и другие фиолетовые флуорохромы недоступны
• Открытая система с аэрозолями: для работы с инфекционными образцами требуется дополнительная защита
• Скорость сортировки до 10 000 событий/сек: для десятков миллионов клеток или редких популяций время может быть значительным
• Только 2-way сортировка в пробирки (1,5/5/15 мл)