Bio-Rad ZE5 Cell Analyzer
Высокопроизводительный исследовательский проточный цитометр-анализатор с 5 лазерами (355, 405, 488, 561, 640 нм) и до 30 параметров детекции. Встроенный загрузчик планшетов (96/384 лунки), режим высокопроизводительного скрининга (HTS) в программном обеспечении Everest. Скорость анализа до 100 000 событий/сек.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Настольный исследовательский проточный цитометр-анализатор |
| Лазеры | До 5: 355 нм (УФ), 405 нм (фиолетовый), 488 нм (синий), 561 нм (желто-зеленый), 640 нм (красный) |
| Форм-фактор | Настольный, увеличенные размеры (около 70x60x55 см) |
| Автосемплер | Встроенный загрузчик планшетов 96/384 лунки |
| Формат данных | FCS 3.1 |
| Скорость анализа | До 100 000 событий/сек |
| Загрузка образцов | Пробирки 12x75 мм, микропробирки, планшеты 96/384 |
| Система жидкостей | Sheath-жидкость под давлением, автоматическая промывка |
| Параметры детекции | До 30 (28 FL + FSC + SSC) |
| Чувствительность (FITC MESF) | <100 молекул |
| Оптическая конфигурация | Модульная, сменные полосовые фильтры |
| Программное обеспечение | Everest Software (с модулем HTS) |
Описание
Назначение
Bio-Rad ZE5 Cell Analyzer - исследовательская платформа для многопараметрической проточной цитометрии с встроенным загрузчиком планшетов. Название ZE5 отражает ключевую особенность: система оснащена пятью лазерами, что делает ее одной из наиболее гибких настольных платформ по спектру возбуждения.
Место в линейке
ZE5 - флагманский анализатор Bio-Rad для проточной цитометрии. Компактный сортер S3e (2 лазера, 4 FL-канала) дополняет линейку функцией физического разделения клеток.
ZE5 позиционируется как альтернатива флагманским анализаторам BD и Beckman Coulter, предлагая до 30 параметров и встроенный автосемплер для планшетов без дорогостоящих внешних модулей.
Принцип работы
Пять лазеров (355, 405, 488, 561, 640 нм) последовательно возбуждают флуорохромы на каждой клетке. Эмиссия направляется на отдельные спектральные модули с дихроичными зеркалами и полосовыми фильтрами. До 28 FL-детекторов плюс FSC и SSC регистрируют суммарно до 30 параметров.
Оптоволоконные световоды направляют эмиссию от точки детекции к фотоумножителям, минимизируя потери сигнала. Оптическая конфигурация модульная: пользователь может заменять полосовые фильтры для адаптации под конкретные панели.
Позиция на рынке
ZE5 конкурирует с BD LSRFortessa X-20, Beckman Coulter CytoFLEX LX и Thermo Fisher Attune NxT. Ключевые преимущества - максимальное число параметров (30) среди настольных конвенциональных анализаторов и встроенный планшетный загрузчик.
Прибор ориентирован на core-лаборатории и центры скрининга, где регулярно выполняются эксперименты с расширенными панелями (12-20+ маркеров) и/или массовый анализ образцов.
Ключевые технологии
Пятилазерная оптическая система
| Лазер | Длина волны | Основные флуорохромы |
|---|---|---|
| УФ | 355 нм | BUV395, BUV496, BUV661, BUV737, BUV805 |
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Желто-зеленый | 561 нм | PE, PE-CF594, PE-Cy5, PE-Cy7 |
| Красный | 640 нм | APC, APC-Cy7, Alexa Fluor 647, Alexa Fluor 700 |
Полный набор из пяти лазеров перекрывает практически весь спектр коммерческих флуорохромов. УФ-лазер 355 нм необходим для серии BUV. Желто-зеленый 561 нм даёт оптимальное возбуждение PE (прирост яркости до 40% по сравнению с 488 нм).
Модульная оптика со сменными фильтрами
Каждый лазер направляет эмиссию на отдельный спектральный модуль. Полосовые фильтры заменяемые, что даёт возможность оптимизировать конфигурацию под конкретные панели. Гибкость редкая для настольного ценового сегмента.
Разрешение по яркости на уровне ведущих анализаторов отрасли: менее 100 MESF (Molecules of Equivalent Soluble Fluorochrome) для FITC-канала.
Встроенный загрузчик планшетов
ZE5 поставляется с встроенным роботизированным загрузчиком для 96- и 384-луночных планшетов. Настраиваемые параметры: объем аспирации, скорость перемешивания, время промывки между лунками.
При скорости 100 000 событий/сек 96-луночный планшет обрабатывается за 10-15 минут (10 000 событий/лунку). Для 384-луночных планшетов (2 000-5 000 событий/лунку) общее время 30-45 минут.
Скорость анализа до 100 000 событий/сек
Высокая пропускная способность электроники детекции даёт возможность обрабатывать до 100 000 клеток в секунду без потери разрешения. Это одна из самых высоких скоростей среди настольных анализаторов.
Скорость критически важна при планшетном скрининге: сокращение времени на лунку пропорционально увеличивает дневную пропускную способность.
Программное обеспечение Everest
Everest включает управление прибором, сбор данных, полную матрицу компенсации для 30 параметров и модуль HTS. Одновременная визуализация до 20 графиков в реальном времени. Встроенный модуль QC с отслеживанием трендов калибровки.
HTS-модуль даётheat-map визуализацию по планшету, статистический анализ по лункам и экспорт для интеграции с LIMS. Данные сохраняются в формате FCS 3.1.
Для кого подходит
- Core-лаборатории - основной инструмент для обслуживания множества исследовательских групп с разнообразными панелями
- Иммунология и иммуноонкология - глубокое фенотипирование с панелями из 15-25 маркеров, анализ опухолевого микроокружения
- Фармацевтический скрининг - оценка лекарственных кандидатов на клеточных моделях в планшетном формате
- Трансляционные исследования - мониторинг иммунного статуса в клинических исследованиях со стандартизованными панелями
- Клеточная терапия (QC) - фенотипирование CAR-T клеток, оценка чистоты продукта, маркеры активации и истощения
- Стволовые клетки - многомаркерная характеристика стволовых и прогениторных клеток
- Биопроизводство - контроль качества клеточных линий-продуцентов в планшетном формате
Особенности эксплуатации
ПО
Everest Software - комплексная платформа для управления прибором, сбора данных и первичного анализа. Поддерживает полную компенсацию для 30 параметров, библиотеку конфигураций и модуль QC.
Данные экспортируются в формате FCS 3.1. HTS-модуль даёт табличный экспорт статистик для Excel, GraphPad Prism, R и скрининговых платформ (CDD Vault, Genedata Screener).
Установка
- Форм-фактор: настольный, увеличенные размеры (около 70x60x55 см)
- Требуется устойчивый стол с достаточной грузоподъемностью
- Стабильное электропитание, умеренный шум от охлаждения лазеров
- Температура: 18-25 C
Обслуживание
Ежедневная процедура QC: деконтаминация, промывка, калибровка с бусами, проверка лазеров и детекторов. Для пятилазерной системы QC занимает 15-20 минут. Расход sheath-жидкости до 10 л в день при интенсивной работе.
Ежегодное ТО включает проверку и юстировку лазеров, замену уплотнений, обновление ПО. После замены полосовых фильтров требуется повторная калибровка. Зонд аспирации планшетного загрузчика требует периодической промывки.
Обучение
Для полного использования возможностей ZE5 оператор должен владеть построением многоцветных панелей, расчетом компенсации и интерпретацией артефактов. Рекомендуемый минимум - опыт работы с многоцветной проточной цитометрией от 1 года.
Базовое обучение от Bio-Rad занимает 3-5 дней. Освоение дизайна панелей на 20+ маркеров требует нескольких месяцев практики.
Ограничения
- Только анализ, функция сортировки отсутствует
- Классическая (конвенциональная) технология компенсации - не спектральное размешивание; разделение сильно перекрывающихся флуорохромов ограничено
- Замена полосовых фильтров - источник потенциальных ошибок; требуется документирование конфигураций
- Высокая квалификация оператора для панелей 20+ маркеров
- Расход sheath-жидкости при интенсивном планшетном режиме значителен
Области применения
Сравнение с аналогами
BD LSRFortessa X-20 - один из наиболее распространенных многолазерных анализаторов, до 5 лазеров и до 20 параметров. Обширная экосистема реагентов BD. ZE5 имеет больше по максимальному числу параметров (30 vs 20), имеет встроенный планшетный загрузчик (у X-20 - опциональный внешний HTS-модуль) и модульную оптику. X-20 имеет по распространенности, доступности сервиса и размеру сообщества.
CytoFLEX LX - компактный анализатор с до 6 лазерами и до 21 FL-каналом. Использует лавинные фотодиоды (APD) вместо ФЭУ, что даёт высокую чувствительность при малых габаритах. ZE5 имеет больше по числу каналов (28 vs 21 FL) и имеет встроенный планшетный загрузчик. CytoFLEX LX компактнее, экономичнее по расходу sheath-жидкости и проще в обслуживании.
Attune NxT - анализатор с акустической фокусировкой, до 4 лазеров и до 16 параметров. Акустическая фокусировка даёт стабильный сигнал при высоких скоростях потока (до 1000 мкл/мин), что ускоряет анализ разбавленных образцов. ZE5 имеет больше по количеству параметров (30 vs 16) и лазеров (5 vs 4). Attune NxT предпочтительнее для задач с большими объемами разбавленных образцов.
Частые вопросы
Чем ZE5 отличается от спектральных цитометров (Cytek Aurora, BD FACSymphony A5 SE)?
ZE5 - классический (конвенциональный) анализатор, использующий дихроичные зеркала и полосовые фильтры для разделения сигнала. Спектральные цитометры регистрируют полный эмиссионный спектр и используют математическое размешивание (unmixing) вместо компенсации. Спектральный подход даёт возможность использовать флуорохромы с сильно перекрывающимися спектрами. ZE5 имеет преимущества: проверенная технология компенсации, высокая скорость (100 000 событий/сек), встроенный планшетный загрузчик и предсказуемое поведение с яркими красителями.
Обязательно ли использовать все 5 лазеров?
Нет. ZE5 доступен в конфигурациях от 3 до 5 лазеров, и не все лазеры должны быть активны в каждом эксперименте. Можно использовать минимальный набор для простых панелей (например, только 488 и 640 нм для 4-цветного анализа) и подключать дополнительные лазеры для расширенных панелей. Это снижает время калибровки и упрощает компенсацию.
Подходит ли ZE5 для клинической диагностики?
ZE5 сертифицирован как исследовательский прибор (Research Use Only, RUO) и формально не предназначен для клинической диагностики (IVD). Он широко используется в трансляционных исследованиях и клинических испытаниях для мониторинга иммунного ответа. Для рутинной клинической диагностики (подсчет CD4 при ВИЧ, иммунофенотипирование лейкозов) следует использовать сертифицированные IVD-платформы.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.