Cytek Aurora
Полноспектральный проточный анализатор с до 5 лазерами (355, 405, 488, 561, 638 нм), 64+ детекторами и возможностью детекции 40+ маркеров одновременно. Технология спектрального размешивания (spectral unmixing) вместо классической компенсации. ПО SpectroFlo.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| Тип | Полноспектральный проточный цитометр-анализатор |
| Лазеры | До 5: 355, 405, 488, 561, 638 нм |
| Детекторы | 64+ APD (лавинные фотодиоды) |
| Технология | Full Spectrum Profiling + Spectral Unmixing |
| Форм-фактор | Настольный |
| Формат данных | FCS 3.1 |
| Скорость анализа | До 35 000 событий/сек |
| Загрузка образцов | Пробирки + автозагрузчик (опция) |
| Автофлуоресценция | Автоматическое вычитание |
| Параметры детекции | 40+ одновременных маркеров |
| Программное обеспечение | SpectroFlo |
Описание
Назначение
Cytek Aurora - полноспектральный проточный цитометр-анализатор. Прибор заменил классическую схему "один фильтр - один детектор - один флуорохром" полноспектральной детекцией с математическим разделением сигналов.
Место в линейке
Aurora - чисто аналитический прибор без функции сортировки. Для физического разделения клеток предназначен отдельный сортер Cytek Aurora CS.
В линейке Cytek Aurora занимает позицию старшей модели. Младшая модель Northern Lights предлагает до 3 лазеров и меньше детекторов. Aurora CS добавляет к аналитической платформе модуль jet-in-air сортировки.
Принцип работы
Каждая частица, проходящая через лазерный луч, генерирует флуоресцентный сигнал. В отличие от классических цитометров, где сигнал регистрируется через узкополосные фильтры, Aurora собирает полный спектр эмиссии с помощью 64+ детекторов.
Полученный суммарный спектр раскладывается на вклады отдельных красителей математически (spectral unmixing). Это даёт возможность разделять флуорохромы с практически одинаковыми пиками эмиссии.
Позиция на рынке
Aurora стала де-факто стандартом спектральной проточной цитометрии. Тысячи установленных систем по всему миру, обширная база валидированных панелей и активное сообщество сформировали целую экосистему.
Онлайн-инструмент Full Spectrum Viewer содержит спектральные референсы всех основных коммерческих красителей и упрощает дизайн панелей.
Технологии
Полноспектральная детекция (Full Spectrum Profiling)
Классический цитометр "видит" каждый краситель через узкий полосовой фильтр. Это как определять цвет предмета, глядя через цветные стёкла по одному. Aurora регистрирует весь спектр эмиссии одновременно.
64+ детекторов собирают информацию по всему диапазону для каждого лазера, формируя многомерный спектральный профиль каждой частицы. Количество извлекаемой информации принципиально выше, чем при фильтровой детекции.
Спектральное размешивание (Spectral Unmixing)
Математическая процедура, заменяющая классическую матричную компенсацию. Суммарный спектр каждой частицы раскладывается на линейную комбинацию эталонных спектров отдельных флуорохромов.
Unmixing использует полную форму спектра, а не только перетоки в соседние каналы. Красители FITC и BB515 (оба эмитируют около 530 нм) неразличимы на классическом цитометре, но успешно разделяются спектрально.
Лазерная система
| Лазер | Длина волны | Основные красители |
|---|---|---|
| УФ | 355 нм | BUV395, BUV496, BUV661, BUV737 |
| Фиолетовый | 405 нм | BV421, BV510, BV605, BV711, BV786 |
| Синий | 488 нм | FITC, PerCP-Cy5.5, BB515 |
| Жёлто-зелёный | 561 нм | PE, PE-Cy5, PE-Cy7 |
| Красный | 638 нм | APC, APC-Cy7, Alexa 700 |
5 лазерных линий покрывают практически весь спектр коммерческих флуорохромов. УФ-лазер 355 нм необходим для серии BUV, одних из наиболее ярких красителей для многоцветных панелей.
APD-детекторы
Вместо классических ФЭУ (фотоэлектронных умножителей) Aurora использует лавинные фотодиоды (APD). Каждый детектор охватывает спектральное окно шириной 10-15 нм.
APD выбраны за высокую квантовую эффективность в красной и ИК-областях, стабильность и компактность. Точное количество детекторов зависит от конфигурации лазеров.
Вычитание автофлуоресценции
Клетки обладают собственной флуоресценцией, особенно выраженной у макрофагов, эозинофилов и дендритных клеток. В классической цитометрии автофлуоресценция создаёт фон, затрудняющий детекцию тусклых маркеров.
Spectral unmixing обрабатывает автофлуоресценцию как отдельный "флуорохром" с собственным спектральным отпечатком. Фон действенно убирается, чувствительность возрастает.
Скорость анализа
Aurora обрабатывает до 35 000 событий в секунду. Поддерживается загрузка из пробирок и автозагрузчик для планшетов (опция).
Для кого подходит
- Системная иммунология - глубокое фенотипирование 30-40+ маркеров из одного образца
- Онкоиммунология - полная характеризация опухолевого микроокружения в одной панели
- Трансляционные исследования - стандартизация панелей между площадками
- Вакцинология - одновременная оценка антиген-специфичных T-клеток, B-клеток памяти, цитокинового профиля
- Гематология - расширенная диагностика гемобластозов с минимальным объёмом образца
- Клеточная терапия - контроль качества CAR-T и NK-продуктов
- Анализ автофлуоресцентных тканей - лёгкие, печень, кишечник, где вычитание фона критически важно
- Core-лаборатории - центральная платформа для множества исследовательских групп
Особенности эксплуатации
Программное обеспечение
SpectroFlo - единая платформа для всех спектральных цитометров Cytek (Northern Lights, Aurora, Aurora CS). Включает настройку эксперимента, сбор данных, расчёт unmixing, визуализацию и экспорт.
Данные сохраняются в формате FCS 3.1. Полная совместимость с FlowJo, FCS Express и другими программами анализа.
Требования к установке
- Форм-фактор: настольный
- Температура: 18-25°C
- Влажность: до 80%
- Электропитание: стандартная сеть
- Специальных помещений не требуется
Обслуживание и расходные материалы
Ежедневная калибровка с помощью SpectroFlo QC Beads занимает 10-15 минут. Процедура автоматизирована. Результаты отслеживаются через трекинг Леви-Дженнингса для контроля долгосрочной стабильности.
Расходные материалы: шитовая жидкость (Sheath Fluid), промывочный раствор, калибровочные бусы.
Обучение
Базовое обучение от Cytek занимает 3-5 дней. Полное освоение дизайна сложных панелей (30+ маркеров) требует нескольких месяцев практического опыта.
При переходе с классической цитометрии основное отличие: мышление категориями "спектральный профиль" вместо "канал = краситель".
Ограничения
- Только анализ, функция сортировки отсутствует (для этого нужен Aurora CS)
- Стоимость реагентов при панелях 30-40 антител значительна
- Дизайн высокопараметрических панелей требует опыта в спектральной совместимости красителей
- Обработка данных с 64+ детекторов требует производительного компьютера
Области применения
Сравнение с аналогами
FACSymphony A5 - старший классический анализатор BD с до 5 лазерами и до 50 параметрами через оптимизированные фильтровые конфигурации. Это максимум, достижимый без спектральной технологии. Aurora даёт сопоставимое число маркеров, но спектральное размешивание лучше справляется с перекрывающимися красителями и автофлуоресценцией. FACSymphony A5 - выбор для лабораторий, уже вложившихся в экосистему BD.
Sony ID7000 - спектральный анализатор с до 7 лазерами и 184 детекторами (40-50+ маркеров). По числу лазеров и детекторов ID7000 имеет больше Aurora (7 vs 5, 184 vs 64+). Aurora имеет значительно большую установленную базу, более развитое сообщество и большее число валидированных панелей. ID7000 - выбор для лабораторий, стремящихся к максимуму параметров.
LSRFortessa X-20 - классический 5-лазерный анализатор BD с до 20 параметрами. Проверенная платформа с огромной методической базой, ограниченная фильтровой детекцией. Aurora принципиально имеет больше по числу параметров (40+ vs 20) и возможности разделения близких флуорохромов. LSRFortessa X-20 остаётся актуальным для лабораторий с устоявшимися панелями, не планирующих расширение.
Частые вопросы
Зачем нужен анализатор Aurora, если есть сортер Aurora CS?
Aurora (анализатор) и Aurora CS (сортер) - взаимодополняющие системы. Анализатор предназначен для высокопроизводительного скрининга и фенотипирования: оптимизация панелей, анализ больших когорт, рутинный мониторинг. Сортер - для физического выделения клеток. Типичная схема: анализ когорты на Aurora, выбор целевых популяций, сортировка конкретных образцов на Aurora CS.
Можно ли использовать панели, разработанные для классических цитометров?
Да, существующие панели работают без модификаций. Спектральная детекция совместима с любыми коммерческими флуорохромами. Однако такие панели не раскрывают потенциал системы. Рекомендуется постепенно расширять набор маркеров, используя красители, недоступные в классической цитометрии из-за спектральных перекрытий. Переход может быть поэтапным: от 15 до 25 и далее до 40+ маркеров.
Каковы основные ограничения Aurora?
Ключевые ограничения: (1) отсутствие функции сортировки, только анализ; (2) высокая стоимость реагентов при панелях 30-40 антител; (3) сложность дизайна панелей, требуется понимание спектральной совместимости красителей; (4) трудоёмкая подготовка одноцветных контролей; (5) вычислительная нагрузка, обработка данных с 64+ детекторов требует мощного компьютера.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.