Waters ACQUITY UPLC Columns
Линейка УВЭЖХ-колонок с тремя технологиями сорбента: BEH (pH 1-12, гибрид), HSS (полярные аналиты), CSH (основания). 14+ фаз. Частицы 1,7-5 мкм, давление до 1034 бар. ACQUITY Premier с MaxPeak HPS для металл-чувствительных аналитов. Оптимизированы для Waters UPLC, совместимы с любым УВЭЖХ.
ООО «Спин Аналитика» не осуществляет продажу оборудования. Платформа является информационно-навигационным сервисом.
Ключевые характеристики
| ID | 1,0 / 2,1 / 3,0 мм |
| Тип | Колонки для УВЭЖХ/ВЭЖХ (BEH/HSS/CSH) |
| Поры | 100 A (HSS), 130 A (BEH, CSH), 300 A (BEH для белков) |
| Длина | 30-150 мм |
| Фазы RP | C18, C8, Shield RP18, Phenyl, Phenyl-Hexyl, PFP, CN, Fluoro-Phenyl, T3 |
| Фазы HILIC | BEH Amide, BEH HILIC |
| Фитинги | Waters проприетарные (конус + ferrule) |
| pH-диапазон | 1-12 (BEH), 2-8 (HSS), 1-11 (CSH) |
| Специальные | ACQUITY Premier (MaxPeak HPS, антиметаллическая поверхность) |
| Макс. давление | 1034 бар (15 000 psi) |
| Совместимость | Waters UPLC, Agilent 1290, Shimadzu Nexera, Thermo Vanquish |
| Размеры частиц | 1,7 / 2,5 / 3,5 / 5 мкм |
| Технологии сорбента | BEH (гибрид), HSS (силикагель), CSH (заряженная поверхность) |
Описание
О производителе
Waters Corporation (Милфорд, Массачусетс) - изобретатель технологии УВЭЖХ (Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC). В 2004 году Waters выпустила первую УВЭЖХ-систему ACQUITY UPLC и субдвухмикронные колонки BEH с частицами 1,7 мкм. Это стало переломным моментом в жидкостной хроматографии - скорость анализа возросла в 5-10 раз при сохранении или улучшении разрешения.
Все колонки ACQUITY производятся в Тонтоне (Массачусетс) и Уэксфорде (Ирландия). Каждая колонка поставляется с сертификатом качества и тестовой хроматограммой.
Обзор линейки ACQUITY
Линейка ACQUITY включает три технологии сорбента (BEH, HSS, CSH), каждая доступна с несколькими фазами. Отдельная подлинейка ACQUITY Premier использует технологию MaxPeak HPS (High Performance Surface) для минимизации адсорбции металл-чувствительных аналитов.
Технологии сорбента
| Технология | Основа | pH-диапазон | Частицы (мкм) | Поры (A) | Назначение |
|---|---|---|---|---|---|
| BEH | Этилен-мостиковый гибрид (органо-силикагель) | 1-12 | 1,7 / 2,5 / 3,5 / 5 | 130 / 300 | Универсальная, высокий pH, белки |
| HSS | Высокопрочный силикагель | 2-8 | 1,8 / 2,5 / 3,5 / 5 | 100 | Полярные соединения, 100% водные фазы |
| CSH | Заряженный поверхностный гибрид | 1-11 | 1,7 / 2,5 / 3,5 / 5 | 130 | Основные соединения при низком pH |
Все доступные фазы
| Серия | Фазы | USP-код | Применение |
|---|---|---|---|
| BEH C18 | Трифункциональный C18 | L1 | Универсальная RP для УВЭЖХ |
| BEH C8 | Трифункциональный C8 | L7 | Меньшее удерживание, быстрое элюирование |
| BEH Shield RP18 | C18 с карбаматной группой | L68 | Основные соединения, 100% водные |
| BEH Phenyl | Фенил | L11 | Ароматическая селективность |
| BEH Amide | Амид | - | HILIC для полярных метаболитов |
| BEH HILIC | Голый BEH | - | HILIC для заряженных соединений |
| HSS T3 | C18 низкой плотности, T3-эндкеппирование | L1 | Полярные + неполярные одновременно |
| HSS C18 | C18 стандартной плотности | L1 | Максимальное удерживание на силикагеле |
| HSS C18 SB | C18, StableBond-аналог | L1 | Низкий pH, кислоты |
| HSS PFP | Пентафторфенил | L43 | Альтернативная селективность (галогены, ароматика) |
| HSS Cyano (CN) | Цианопропил | L10 | Минимальное удерживание |
| CSH C18 | C18 на заряженной поверхности | L1 | Основания при низком pH (муравьиная кислота) |
| CSH Phenyl-Hexyl | Фенил-гексил на CSH | L11 | Ароматика + основания |
| CSH Fluoro-Phenyl | Фторфенил на CSH | L43 | Галогенсодержащие аналиты |
BEH (Bridged Ethylene Hybrid)
BEH - флагманская технология Waters. Органо-силикагельная матрица: этиленовые мостики между атомами кремния делают структуру устойчивой к гидролизу при высоком pH. Стандартные силикагельные колонки деградируют при pH > 8. BEH стабильна до pH 12.
Когда выбирать BEH
BEH C18 - колонка первого выбора для УВЭЖХ. Широкий pH-диапазон (1-12) снимает ограничения по подвижной фазе. Для анализа оснований при pH 10 (нейтральная форма, лучшая форма пиков) BEH C18 - стандартное решение.
BEH Amide - основная колонка для HILIC-метаболомики. Амидная фаза на BEH-матрице стабильнее аминопропильных колонок и менее склонна к деградации при работе с восстанавливающими сахарами.
Характеристики BEH
| Параметр | BEH 130A | BEH 300A |
|---|---|---|
| Пора | 130 A | 300 A |
| Площадь поверхности | 185 м2/г | 120 м2/г |
| Углеродная загрузка (C18) | 18% | 11% |
| pH-диапазон | 1-12 | 1-12 |
| Макс. давление | 1034 бар (15 000 psi) | 1034 бар |
| Частицы | 1,7 / 2,5 / 3,5 / 5 мкм | 1,7 / 3,5 / 5 мкм |
| Назначение | Малые молекулы | Белки, пептиды |
Размеры BEH C18 (130A, 1,7 мкм)
| ID (мм) | Длина (мм) | Артикул |
|---|---|---|
| 2,1 | 30 | 186002349 |
| 2,1 | 50 | 186002350 |
| 2,1 | 100 | 186002352 |
| 2,1 | 150 | 186002353 |
| 1,0 | 50 | 186002344 |
| 1,0 | 100 | 186002346 |
| 1,0 | 150 | 186002347 |
Для фаз C8, Shield RP18, Phenyl артикулы отличаются (см. раздел материалов).
HSS (High Strength Silica)
HSS - высокопрочный силикагель для задач, где нужна классическая силикагельная селективность, но с прочностью под давление УВЭЖХ. HSS выдерживает до 1034 бар (vs 400 бар у обычного силикагеля 5 мкм).
HSS T3 - главная фаза
T3 (Trifunctional C18 with T3-endcapping) - самая популярная фаза HSS. Низкая плотность привитого C18 и фирменное T3-эндкеппирование сохраняют смачиваемость при 100% водной подвижной фазе. HSS T3 удерживает полярные соединения, которые «проскакивают» через обычный C18.
Разница BEH C18 vs HSS T3: BEH C18 - более гидрофобная (18% углерода), лучше для неполярных аналитов. HSS T3 - менее гидрофобная (11% углерода), лучше для полярных. При разработке метода полезно протестировать обе.
Характеристики HSS
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Пора | 100 A |
| Площадь поверхности | 230 м2/г |
| Углеродная загрузка (T3) | 11% |
| pH-диапазон | 2-8 |
| Частицы | 1,8 / 2,5 / 3,5 / 5 мкм |
| Фазы | T3, C18, C18 SB, PFP, CN |
CSH (Charged Surface Hybrid)
CSH - гибридная матрица с положительно заряженной поверхностью при низком pH. Заряд отталкивает протонированные основания от силанольных групп, устраняя хвостирование пиков. При нейтральном и высоком pH заряд исчезает, и колонка работает как стандартная.
Когда выбирать CSH
CSH C18 - выбор для анализа основных лекарств (большинство фармпрепаратов - основания) в условиях ЖХ-МС: кислая подвижная фаза (0,1% муравьиная кислота, pH 2,5-3) + ацетонитрил. В этих условиях обычные C18-колонки дают хвостящие пики для оснований. CSH C18 даёт симметричные пики без добавления ион-парных реагентов.
Характеристики CSH
| Параметр | Значение |
|---|---|
| Пора | 130 A |
| Площадь поверхности | 185 м2/г |
| Углеродная загрузка (C18) | 15% |
| pH-диапазон | 1-11 |
| Частицы | 1,7 / 2,5 / 3,5 / 5 мкм |
| Фазы | C18, Phenyl-Hexyl, Fluoro-Phenyl |
ACQUITY Premier (MaxPeak HPS)
ACQUITY Premier - колонки с технологией MaxPeak HPS (High Performance Surface). Внутренние металлические поверхности колонки покрыты инертным гибридным слоем, предотвращающим адсорбцию металл-чувствительных аналитов.
Зачем нужна Premier
Фосфорилированные пептиды, олигонуклеотиды, фосфолипиды, органические кислоты (лимонная, щавелевая), катехоламины и ряд лекарств адсорбируются на металлических поверхностях стандартных колонок (фриты, стенки). Результат: занижение концентрации, «призрачные» пики, низкая воспроизводимость первых инъекций.
Premier-колонки устраняют эту проблему. На первой инъекции Premier и стандартная колонка отличаются на 20-80% по площади пика для металл-чувствительных аналитов.
Доступные фазы Premier: BEH C18, CSH C18, HSS T3, BEH Amide. Размеры: 2,1 x 50/100/150 мм.
Как выбрать колонку ACQUITY
По аналиту и задаче
| Задача | Фаза |
|---|---|
| Универсальный RP-анализ | BEH C18 |
| Полярные + неполярные одновременно | HSS T3 |
| Основания при кислом pH (ЖХ-МС) | CSH C18 |
| Высокий pH (основания в нейтральной форме) | BEH C18 (pH 10) |
| HILIC (полярные метаболиты) | BEH Amide |
| Белки и пептиды | BEH 300A C18/C4 |
| Металл-чувствительные аналиты | ACQUITY Premier |
| Ароматическая селективность | BEH Phenyl или CSH Phenyl-Hexyl |
| 100% водная фаза | HSS T3 или BEH Shield RP18 |
По размеру частиц
| Частицы | Система | Давление | Когда |
|---|---|---|---|
| 1,7 мкм | ACQUITY UPLC, ACQUITY Premier | до 1034 бар | Максимальная эффективность и скорость |
| 2,5 мкм | ACQUITY или стандартный ВЭЖХ | до 600 бар | Компромисс для существующих систем |
| 3,5 мкм | Стандартный ВЭЖХ | до 400 бар | Масштабирование метода |
| 5 мкм | Препаративный ВЭЖХ | до 400 бар | Препаративная очистка |
Совместимость с оборудованием
ACQUITY-колонки оптимизированы для Waters UPLC, но совместимы с УВЭЖХ других производителей при давлении до 1034 бар.
| Система | Совместимость |
|---|---|
| Waters ACQUITY UPLC H-Class / I-Class | Полная (нативная) |
| Waters ACQUITY Premier | Полная (Premier-колонки) |
| Agilent 1290 Infinity II | Да (1200 бар макс.) |
| Shimadzu Nexera LC-40 / X3 | Да (1000-1300 бар) |
| Thermo Vanquish | Да (1050-1500 бар) |
Фитинги: проприетарные Waters (конус + ferrule). Для подключения к системам других производителей - переходные фитинги или универсальные соединители (IDEX).
Важно: внесистемный мёртвый объём критичнее для колонок 1,0 мм ID (20 мкл мёртвого объёма снижает эффективность на 50%). Для 2,1 мм ID допустим мёртвый объём до 5 мкл.
Области применения
Сравнение с аналогами
ZORBAX RRHD - субдвухмикронные колонки Agilent (1,8 мкм) на полностью пористом силикагеле. ACQUITY BEH (1,7 мкм) имеет гибридную органо-силикагельную матрицу, стабильную при pH до 12 (vs pH 9 у ZORBAX Eclipse Plus). ZORBAX предлагает более широкий ассортимент фаз и серий (10+ vs 3 технологии у ACQUITY). BEH имеет уникальные фазы (Amide для HILIC, Shield RP18). Для высокого pH - BEH. Для широты ассортимента - ZORBAX.
Kinetex - поверхностно-пористые (core-shell) колонки 1,3-5 мкм. Core-shell частицы на 30-50% эффективнее полностью пористых ACQUITY при том же давлении. ACQUITY BEH стабильнее при экстремальных pH. Kinetex доступнее по стоимости. Premier-аналога у Kinetex нет. Для максимальной скорости при стандартном pH - Kinetex. Для pH > 8, белков и металл-чувствительных аналитов - ACQUITY.
Hypersil GOLD - колонки на высокочистом силикагеле (1,9-5 мкм). По pH-стабильности уступает BEH (pH 2-8 vs 1-12). ACQUITY имеет больше фаз и технологий (BEH, HSS, CSH, Premier). Hypersil GOLD интегрирован в Chromeleon. Для экосистемы Thermo - Hypersil. Для максимальной гибкости и pH > 8 - ACQUITY.
Частые вопросы
BEH C18 или HSS T3 - что выбрать?
BEH C18: углеродная загрузка 18%, максимальное удерживание гидрофобных аналитов, pH 1-12. HSS T3: загрузка 11%, лучше удерживает полярные соединения, работает в 100% воде, pH 2-8. Для неполярных лекарств и липидов - BEH C18. Для полярных метаболитов, водорастворимых витаминов и аминокислот - HSS T3. При разработке метода имеет смысл протестировать обе колонки.
Зачем нужна Premier-версия?
Premier-колонки имеют покрытие MaxPeak HPS на внутренних металлических поверхностях. Фосфорилированные пептиды, олигонуклеотиды, органические кислоты и катехоламины адсорбируются на металле стандартных колонок - площадь пика первых инъекций занижена на 20-80%. Premier устраняет эту проблему. Для аналитов без сродства к металлу стандартная колонка достаточна.
Совместимы ли ACQUITY-колонки с УВЭЖХ не Waters?
Да. ACQUITY-колонки выдерживают до 1034 бар и работают на Agilent 1290 (1200 бар), Shimadzu Nexera (1000-1300 бар), Thermo Vanquish (1050-1500 бар). Нюанс: Waters использует проприетарные фитинги (конус + ferrule). Для подключения к Agilent/Shimadzu нужны переходные фитинги (IDEX, Waters Universal Connector) или замена концевых фитингов.
CSH C18 или BEH C18 для ЖХ-МС?
Для ЖХ-МС с ESI-источником (кислая подвижная фаза: 0,1% муравьиная кислота) и основными аналитами - CSH C18 даёт лучшую форму пиков. Заряженная поверхность CSH отталкивает протонированные основания от силанолов. Для нейтральных и кислых аналитов - BEH C18 достаточна. Для высокого pH (аммонийный буфер) - только BEH C18 (pH до 12 vs 11 у CSH).
Сколько инъекций выдерживает колонка?
При соблюдении условий эксплуатации (фильтрация образцов, правильные буферы, предколонка): BEH - 5000-10 000 инъекций. HSS - 3000-5000 инъекций (силикагель менее стабилен при pH > 7). Деградация проявляется как потеря эффективности (уширение пиков), изменение удерживания и рост давления. Предколонка (VanGuard) увеличивает ресурс в 2-3 раза.
Дополнительные материалы
Коды для госзакупок
Возможные коды ОКПД2 для закупки данного оборудования по 44-ФЗ и 223-ФЗ. Выбор кода зависит от назначения и контекста закупки.
Коды КТРУ регулярно обновляются Минфином и зависят от конкретных характеристик закупаемого оборудования (автоматическое/полуавтоматическое, с охлаждением/без и т.д.). Актуальные коды КТРУ доступны только в Единой информационной системе закупок.
Информация о кодах ОКПД2 носит справочный характер. Коды приведены в качестве примера возможных вариантов классификации данного оборудования. Выбор кода, его соответствие нормативно-правовым актам и целесообразность применения определяются заказчиком самостоятельно. ООО «Спин Аналитика» не несёт ответственности за некорректное применение указанных кодов при осуществлении закупочных процедур.